TÉCNICAS DE EXTRAÇÃO DE METABÓLITOS
Fernando Kurovski Gonçalves
TÉCNICAS DE EXTRAÇÃO DE METABÓLITOS
ROLIM DE MOURA
NOVEMBRO/ 2013
TÉCNICAS DE EXTRAÇÃO DE METABÓLITOS
O termo extração significa retirar, da forma mais seletiva e completa possível, as substâncias ou fração ativa contida na droga vegetal, utilizando, para isso, um líquido ou mistura de líquidos tecnologicamente apropriados e toxicologicamente seguros. Na escolha de um método extrativo, deve-se avaliar a eficiência, a estabilidade das substâncias extraídas, a disponibilidade dos meios e o custo do processo escolhido, considerando a finalidade do extrato que se quer preparar. A preparação das amostras é umas das etapas cruciais na análise do metaboloma porque é nessa eatapa que se introduz a maior parte dos artefatos analíticos. O primeiro passo é a interrupção rápida do metabolismo celular, o que no inglês é chamado de “quenching” celular. A interrupçãoinstantânea do metabolismo é necessaria pois os níveis metabólitos variam muito rapidamente em função de quaisquer alterações no ambiente da célula (ex. Decréscimo ou aumento do nível de oxigênio dissolvido; variação na luminosidade, no caso de organismos fotossintetizantes, entre outros). A meia-vida típica de metabólitos primários intracelulares está na ordem de uma segundo ou menos. Embora a meia-vida dos metabólitos extracelulares, seja maior que dos intracelulares, ainda é importante interromper qualquer atividade bioquimica nas amostras extracelulares, para se evitar qualquer variação nos níveis dos metabólitos. O “quenching” metabólico é obtido através de uma alteração drástica de temperatura ou de pH. Existe uma grande variedade de metodologias descritas na literatura, sendo que a amostragem em nitrogênio líquido ou em solução de metanol frio