reacao de polimerização em cadeia

Reação de Polimerização em Cadeia (PCR) – a máquina de copiar DNA Reação em cadeia da polimerase ( Polymerase Chain Reaction - PCR), é un método de que se baseia na replicação de DNA (ácido desoxirribonucleico), em pouco tempo . Processo que ocorre em vitro ( sem o uso de um organismo vivobactéria ou leveduras) . Este método foi criado em 1993, foi prémio nobel em química. Com a PCR, quantidades mínimas de material genético podem ser amplificadas milhões de vezes em poucas horas, permitindo a deteção rápida e fiável dos marcadores genéticos de doenças infeciosas, cancro ou doenças genéticas. A PCR está formulado de acordo com o princípio natural de replicação de DNA, é um processo que decorre em três passos, que em conjunto formam um ciclo. Ocorre num termociclador (equipamento que controla e alterna automaticamente as temperaturas durante períodos de tempo programados para o numero apropriado de ciclos geralmente de 25 a 30 ciclos, sendo possível aumentar, em cada ciclo, duas vezes a concentração de DNA pré-existente), para tal ser concretizável, as DNA polimerases utilizadas deverão ser termoestáveis, isso só é conseguido com o isolamento da DNA polimerase da estirpe termofílica Thermus aquaticus (Taq DNA polimerase) que actua a temperaturas elevadas levando assim a um aumento da especificidade da reação. De referir ainda que o produto de PCR pode ser visualizado após eletroforese em gel de agarose e o seu tamanho ser estimado por comparação com padrões…

REAÇÃO DA POLIMERASE EM CADEIA - PCR O QUE É PCR? 1. É uma metodologia que se baseia na amplificação exponencial seletiva de uma quantidade reduzida de DNA de uma única célula, sem o uso de um organismo vivo. HISTÓRICO 1. Karys Mullis descreveu a PCR no final da década de 1980. 2. Em 1989, a Hoffman La Roche & Perkin-Elmer Corporation patenteou este processo . 3. O Prêmio Nobel da Química foi atribuído à Karys Mullis pelo seu trabalho em 1993. 4. Atualmente, método PCR é usado…

de PCR (reação em cadeia da polimerase). Na década de 1980, passou-se a utilizar a técnica do PCR para fazer milhares de cópias de um único pedaço de DNA. Essa técnica é usada em tubos de ensaio contendo o DNA e mais alguns compostos necessários, como primers (DNAs iniciadores) e a enzima DNA polimerase (enzima que faz a replicação do DNA). Os primers são fitas de DNA, com mais ou menos 20 bases (A, T, C, G) complementares, isto é se ligam por complementaridade ao início da sequência…

Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) PCR - consiste em fazer cópias de DNA “in vitro”, usando os elementos básicos do processo de replicação natural do DNA. PCR Amplifica uma Seqüência Alvo Seqüência Alvo Replicação “in vitro” do DNA DNA DNA Supercoiled Alternância de temperaturas a cada ciclo: DESNATURAÇÃO ANELAMENTO Cromossomo POLIMERIZAÇÃO Alternância de temperaturas a cada ciclo D. Desnaturação: 94 C - 96 °C A. Anelamento: 37 C - 65 °C E.…

PCR em tempo real Pesquisa Uma Inovação tecnológica da Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) Caroline Monteiro Novais Estudante do curso de farmácia do Centro Universitário de Barra Mansa. E-mail: carol_farmacia@hotmail.com Melissa Pires-Alves Doutora em Biologia Celular e Molecular pela Universidade Federal do Rio Grande do Sul, Professora do Centro Universitário de Barra Mansa. E-mail: melalves@ig.com.br Colaborador Fábio Freitas Silva Introdução advento da…

Reação em cadeia da polimerase (PCR) A reação em cadeia da polimerase (PCR, Polymerase Chain Reaction) foi inicialmente desenvolvida por Saiki e colaboradores em 1985. Em seguida, foi aprimorada por Kary Mullis, que tentou publicar seus experimentos nas duas revistas científicas mais importantes do mundo, a Science e a Nature, as quais não reconheceram a importância de tal conquista. Kary Mullis acabou publicando seu trabalho sobre a amplificação do gene da β-globina humana em uma…

REAÇÃO DE POLIMERIZAÇÃO EM CADEIA (PCR) PCR - consiste em fazer cópias de DNA “in vitro”, usando os elementos básicos do processo de replicação natural do DNA ou cDNA. O processo de PCR foi descrito por Kary Mullis no final da década de 1980, tendo-lhe sido posteriormente, em 1993, atribuído o Prêmio Nobel de Química pelo seu trabalho. Em 1989, a Hoffman La Roche & Perkin-Elmer Corporation patentearam este processo. Bactéria Thermus aquaticus (Taq-polimerase).…

REAÇÃO EM CADEIA DA POLIMERASE PCR PCR – Reação em Cadeia da Polimerase Objetivo: • Aumentar o número de cópias do DNA a ser estudado http://www.sumanasinc.com/webcontent/anisamples/molecularbiology/pcr.html PCR – Reação em Cadeia da Polimerase Aplicações: • Na identificação e tratamento de doenças condicionadas geneticamente; • No diagnóstico muito sensível e específico de doenças infecciosas e parasitárias; • No diagnóstico do câncer; • Na manipulação terapêutica…

Introdução A reação em cadeia da Polimerase é uma metodologia que pode ser executada inteiramente in vitro, sem o uso de células. A PCR possibilita a síntese de fragmento de DNA, usando a enzima DNA-polimerase, a mesma que participa da replicação do material nas células. Esta enzima sintetiza uma sequencia linear de DNA, desde que exista um iniciado, primer, que esteja ligado a uma das cadeia do DNA no ponto escolhido para o início da síntese. Os iniciadores definem a sequência a ser…

Termociclador REAÇÃO EM CADEIA DA POLIMERASE (PCR) Técnica que permite a amplificação da quantidade de DNA específico utilizando a enzima Taq DNA polimerase, sequências iniciadoras específicas (primers) e variações de temperatura controladas. ETAPAS DO PCR 1. Adição de reagentes DNA ETAPAS DO PCR 1. Adição de reagentes DNA dATP dCTP dGTP dTTP (nucleotideos) ETAPAS DO PCR 1. Adição de reagentes DNA Taq polimerase Primers Tampão Água dATP dCTP dGTP…