Determinação dos parâmetros cinéticos da

2º Semestre - Ano Letivo 2011/2012 Curso: Bioquímica Trabalho Nº 11 – Determinação dos parâmetros cinéticos da polifenoloxidase Introdução A caracterização de uma enzima passa necessariamente pela determinação dos seus parâmetros cinéticos. Estes devem ser determinados numa preparação de enzima do mais alto grau de pureza possível, para evitar a interferência de outros compostos presentes no extrato enzimático. Por exemplo a presença de inibidores ou de outras enzimas que também atuem sobre o substrato pode falsear significativamente os resultados obtidos. No entanto em muitos casos como primeira abordagem esta determinação poderá ser realizada utilizando um extrato enzimático, ou utilizando uma preparação da enzima parcialmente pura. Neste trabalho iremos comparar os parâmetros cinéticos da polifenoloxidase num extrato enzimático e numa preparação parcialmente pura preparada no trabalho anterior. A enzima será caracterizada relativamente à catálise da reação de oxidação do L-DOPA. Após determinação das velocidades de reação para diferentes concentrações de substrato os valores de Km e Vmax serão calculados utilizando os diversos métodos disponíveis: LineweaverBurk, Eadie-Hofstee e Hanes. Material Espectrofotómetro Banho de Gelo Reagentes Tampão fosfato de sódio pH 6,8, 0,1M L-3,4-dihidroxifenilalanina (L-DOPA) 20 mM no tampão anterior Procedimento Experimental Para determinar os parâmetros cinéticos determine a velocidade inicial da reação para cada uma das…

UNIVERSIDADE DO SUL DE SANTA CATARINA KARINE A. S. MICHELOTO NATALIA H. MOTTA WALTER SATIRO JUNIOR DETERMINAÇÃO DOS PARÂMETROS CINÉTICOS DE UMA REAÇÃO QUÍMICA TUBARÃO 2013 1. INTRODUÇÃO Cinética química é o estudo das velocidades das reações químicas e dos mecanismos de reação, que nos permite prever, de antemão, a taxa na qual as espécies químicas reagem e controlar a mesma da maneira desejada, pode-se…

oxigênio, um processo chamado de escurecimento enzimático. O escurecimento resulta da reação entre a polifenoloxidase e fenóis existentes no alimento, como por exemplo, o catecol que é oxidado à quinona e água, como na reação abaixo: A quinona, por sua vez, é um composto que possui uma considerável absorção de luz na região de comprimento de onde na faixa de 458 nm, o que possibilita a sua quantificação a partir do uso de um espectrofotômetro. Relacionando a quantidade…

89232E-06 1,491631799 0,399870688 4 0,07 2,55953E-06 1,685579196 0,522109241 5 0,061 2,28724E-06 1,886243386 0,634587225 6 0,055 2,10571E-06 2,048850575 0,717278941 7 0,042 1,7124E-06 2,519434629 0,924034523 8 0,037 1,56113E-06 2,763565891 1,016521835 9 0,03 1,34935E-06 3,197309417 1,162309649 10 0,029 1,31909E-06 3,270642202 1,184986358 Utilizou-se a seguinte equação do método das integrais, considerando que a reação seja de pseudo-primeira ordem.…

Universidade Federal de Uberlândia Faculdade de Engenharia Química Laboratório de Engenharia Química 2 Módulo 1 - Bioquímica Atividade da Enzima Invertase Alunas: Laryssa Christina Batista Cordeiro Lidiane Pereira Bessa Lorrana Queiroz Ramos Kimberly de Freitas Oliveira Módulo 1 • Prática I - Determinação de Parâmetros Cinéticos de Reação Enzimática • Prática II - Influência do pH na Atividade Enzimática • Prática III - Influência da Temperatura na Atividade Enzimática 2 Objetivos…

DETERMINAÇÃO DA ESTEQUIOMETRIA, DOS PARAMETROS CINÉTICOS E EXPRESSÃO DE ARRHENIUS DE UMA REAÇÃO QUÍMICA IRREVERSÍVEL HOMOGÊNEA EM FASE LÍQUIDA, ATRAVÉS DO SOFTWARE VLAB. (espaço duplo: não apague esta linha ela não será impressa) Jailton C. da Rocha1, Marcos M. Mazzuco2. (espaço simples: não apague esta linha ela não será impressa) 1- jailtoncr@hotmail.com 2- Marcos.Mazzucco@unisul.br (professor da disciplina) (espaço duplo: não apague esta linha…

Paulo Departamento de Engenharia Química Relatório final de trabalho de Iniciação Científica ESTUDO CINÉTICO EM REATOR CALORIMÉTRICO Aluno: Igor Bernardino Orientador: Prof Reinaldo Giudici (EPUSP, Depto Eng Química) 1.INTRODUÇÃO O estudo cinético de reações químicas é de fundamental importância para o controle e desenvolvimento de processos industriais, sendo usado para otimização de reações efetuadas em larga escala. Sem o conhecimento de parâmetros cinéticos como energia de…

Politécnico (IPRJ-UERJ) e Universidade Federal de Uberlândia (UFU), Uberlândia /MG, Brasil. 28-30 nov. 2012. Associação Brasileira de Engenharia e Ciências Mecânicas – ABCM DETERMINAÇÃO DE PARÂMETROS DE ADSORÇÃO ATRAVÉS DO ALGORITMO INVERSO R2W Géssica Ramos da Silva – gessica.1803@gmail.com Melicia Aline Cortat Ribeiro – macribeiro@iprj.uerj.br Antônio José da Silva Neto – ajsneto@iprj.uerj.br Leôncio Diógenes Tavares Câmara – dcamara@iprj.uerj.br Universidade do Estado do Rio de…

regulamentação destes fármacos e células upstream downstream 3 03-10-2014 SEQUÊNCIA DAS OPERAÇÕES ENVOLVIDAS NUM PROCESSO INDUSTRIAL UTILIZANDO A BIOTECNOLOGIA Selecção do biocatalisador Preparação do meio de crescimento Crescimento das células Imobilização celular / enzima Preparação substrato Resíduos celulares Extracção e purificação da enzima Operação utilizando células / enzimas imobilizadas Recirculação do substrato não consumido…

Michaelis e Menten (1913), propuseram uma teoria geral de cinética enzimática. Do ponto de vista inicial, assumiu-se que a enzima E (fórmula molecular) e o substrato S se combinem para forma o complexo ES, o qual então se dissocia no produto P e na enzima livre (ou não combinada) E. DETERMINAÇÃO DE PARÂMETROS CINÉTICOS DE REAÇÃO ENZIMÁTICA 1 - OBJETIVOS Determinar os parâmetros cinéticos da hidrólise da sacarose pela enzima invertase, utilizando o método de Lineweaver–Burk, à …