Relatorio de bioprocessos
Instituto de Ciências Agrárias
Curso de Engenharia Ambiental
Disciplina de GET018 - Bioprocessos Aplicados
Aula Prática 3
Construção da Curva Padrão de Fluoresceína de Sódio (FS)
Alunos:
Letícia Basso Silva - 11221EAB026
Patrick Rodrigues da Silva - 11221EAB030
Paula de Oliveira Menegaz - 11211EAB037
Rafael Cordeiro de Carvalho – 11121EAB039
Rodrigo de Almeida O. Peixoto – 11221EAB029
Uberlândia, MG
Novembro/2013
1- Introdução A curva-padrão corresponde à relação gráfica entre os valores de absorbância e os de concentração. Com base na análise gráfica é possível verificar a linearidade da reação e calcular um fator de conversão de valores de absorbância em concentração. Para determinarmos a concentração de um soluto em uma amostra por espectrofotometria, temos a comparação da absorbância da amostra com uma solução padrão.
2- Materiais
Solução estoque de Fluoresceína de Sódio
Pipeta 1000
Solução B
Solução tampão
Espectrofotômetro
3- Desenvolvimento Para preparar os pontos da curva em duplicata, foi usado uma solução estoque de Fluoresceína a 50ug/ml, conforme a tabela dada em aula. No nosso caso,grupo 6, foram pipetados 2500 uL da solução B, depois, acrescentamos 2500uL da solução tampão (esta feita na aula anterior), e por fim adicionamos 500 uL de FS. Contudo, foi obtido uma solução de 5ml, sendo que, nesta, se encontrava uma concentração de FS de 5ug/ml . A solução foi deixada em repouso por 20 minutos para a sua estabilização, após este tempo foi feita a leitura do branco com a amostra do grupo 1. Os demais pontos foram lidos,pipetando, 2000 uL da parte superior na cubeta.
4- Resultados
A partir dos procedimentos feitos, os dados abaixo foram obtidos:
Tabela 1 – Dados
[FS]
Média
0
0
0,3
0,0595
0,6
0,1505
1,2
0,1520
2,5
0,4295
5
0,707
A partir dos dados acima a curva padrão