Homogenato

Extração do RNA total A extração do RNA total foi realizada através da homogeneização dos tecidos em 1 mL de reagente de Trizol® (Invitrogen, SP, Brazil), conforme recomendações do fabricante. Em seguida foram adicionados 200 μL de clorofórmio ao homogenato, sendo este posteriormente submetido à agitação e centrifugação (12.000 g, durante 15 min a 4°C). Após a centrifugação, a fase aquosa contendo o RNA foi transferida para um novo tubo, ao qual foram adicionados 500 μL de álcool…

observada.4 Isto indica que a absorção de um material tóxico proveniente da pele queimada para a circulação é o evento que inicia as conseqüências patológicas. CONDUTAS ATUAIS EM QUEIMADURAS Homogenatos estéreis de pele queimada injetados na cavidade peritoneal de cobaios matou-os enquanto que homogenatos estéreis de pele normal não queimada não apresentaram qualquer toxicidade.5 A morte dos cobaios não foi relacionada com a sepse ou com a infecção, pois o material tóxico extraído…

cotilédones triturados em um processador até a obtenção de uma farinha de granulação fina. Em seguida, a farinha foi homogeneizada em tampão Tris-HCl 50 mM, pH 7,5, na proporção 1:10 (p/v), sob agitação constante por 3 horas a temperatura ambiente. O homogenato foi centrifugado a 8.000 x g por 30 minutos a 4 ºC. O sobrenadante resultante dessa centrifugação foi denominado extrato bruto (Figura 2). Sheyla Varela Lucena Programa de Pós-Graduação em Bioquímica/UFRN 27 MATERIAIS E…

centrifugação diferencial. Inicialmente é feita a ruptura da membrana plasmática que pode ser feita por exposição a ultra-sons, trituração com homogeneizadores mecânicos ou através de liquidificadores; de seguida a “suspensão de células rompidas”, lisado ou homogenato, é sujeita a uma série de centrifugações de velocidade crescente, em cada uma é possível separarmos determinado componente. Existem outros métodos para obter de forma isolada os organelos: - Centrifugação em gradiente de…

submucosa. A mucosa gástrica foi picada em pedaços menores, pesada, transferida para o tampão de homogeneização (Tris HCL 50 mM - pH 7,4 - sacarose 250 mM, MgCl2 10 mM, KCl 5 mM, EDTA 1 mM e coquetel de inibidores de protease 0,01 %) e homogeneizada. O homogenato foi centrifugado a 9000x g por 40 minutos, o precipitado foi descartado e o sobrenadante novamente centrifugado a 100000x g 36 por 1 h, obtendo-se um precipitado com as vesículas da membrana apical contendo a H+, K+ ATPase não…

com o consumo de oxigênio, aumenta a produção de ATP que passa a inibir a fosfofrutocinase 1. É a regulação alostérica desta enzima. 06)- Qual é o rendimento de ATP quando cada um dos seguintes substratos é completamente oxidado a CO2 por um homogenato celular de mamíferos? Suponha que a glicólise, o CK e a fosforilação oxidativa estejam completamente ativos. a- piruvato b- lactato c- galactose Solução: Uma questão para treinamento de balanço energético. a- 12,5 ATPs b- 15 ATPs

da Atividade da Poligalacturonase (PG) A extração enzimática foi realizada segundo técnica de Buescher e Furmanshi (1978), com modificações, utilizando-se 5g de polpa do fruto congelado, homogeneizado em polytron, com água destilada gelada. O homogenato foi filtrado em tecido fino (organza) e o resíduo ressuspendido em NaCl 1N resfriado. O pH foi ajustado para 6,0 com auxílio de NaOH 0,01N e o extrato foi incubado a 4°C por uma hora. O extrato foi novamente filtrado em papel filtro e…

enriquecidas em peptídeos de folhas de Guaco (Mikania glomerata) contra fitopatógenos de importância comercial, visando aplicação biotecnológica. Folhas frescas de guaco foram maceradas, o homogenato foi centrifugado, e o sobrenadante foi nomeado extrato solúvel (ES). O precipitado foi ressuspendido com LiCl, o homogenato foi centrifugado e o sobrenadante foi denominado extrato de parede celular (EP). ES e EP foram fracionados por ultrafiltração em membranas com limite de exclusão de 3 e…

laboratório a partir de extractos celulares com as células desintegradas. Apenas catorze anos após estas experiências realizadas por Krebs, é que tal experiência foi realizada com sucesso por Philip Cohen e Mika Hayano. Estes investigadores prepararam homogenatos onde um dos principais requerimentos era a adição de cofactores como NAD e ATP, uma vez que se dava a diluição destes cofactores quando se provocava a desintegração celular num meio aquoso, e a sua adição ao meio…

afinidade pelo tecido pulmonar de uma variedade de espécies mamíferas. TRANSMISSÃO: o PVM é um vírus estritamente pneumotrópico, não se disseminando facilmente por contato direto, e só é transmitido experimentalmente por instilação nasal de homogenato pulmonar. O vírus não atravessa a placenta, não sobrevive na presença de anticorpos (neutralizantes) em camundongos jovens; entretanto, ocasiona uma infecção aguda, assintomática e enzóotica. As infecções agudas que se observam como…