Salting Out
Apresentação de resultados
Andreia Sousa 67991
Diana Santos 69760
Método do Biureto
Tabela I – Registo dos valores de D.O. e BSA
BSA mg/ml
P0
0
P1
G1
G2
G3
G4
G5
média
0
0
0
0
0
0
2,5
0,11
0,118
0,015
0,102
0,108
0,1095
P2
5
0,207
0,227
0,011
0,225
0,224
0,22075
P3
10
0,412
0,419
0,028
0,423
0,449
0,42575
0,296
0,25
0,475
0,449
F5x
F10x
0,642
225
0,167
20% (dil 5x)
30% (dil 5x)
200
40% (dil 10x)
225
50% (dil 10x)
60% (dil 10x)
0,33
0,319
0,333
0,183
0,074
0,104
0,28
0,239
Determinação da quantidade de proteína total (D.O.)
Reta de regressão
0,45
0,419 y = 0,0399x + 0,022
R² = 0,999
0,4
Absorvância
0,35
0,3
0,227
0,25
0,2
0,15
0,118
0,1
0,05
0
0
2
4
6
BSA (mg/mL)
8
10
12
Gráfico 1 – Reta de regressão com os tendo em conta os valores de absorvância de p1, p2 e p3.
Equação da reta y= 0,0399𝛼 + 0,022
Valor de 𝑅2 = 0,999, valor próximo de 1 indicando que o modelo estatístico linear se ajusta bem aos valores medidos. Fracionamento com sulfato de amónio Tabela II – Quantidade de proteína obtida através do método de fracionamento por sulfato de amónio
Quantidade
de sulfato de amónio
(g)
Peso do
Peso do
Proteína
microtúbulo microtúbulo (g) vazio (g)
+
depositado
(g)
30% (dil 5x)
0,1131
0,957
1,197
0,24
40% (dil 10x)
0,1509
0,95
1,29
0,34
Tabela III – Determinação da % de proteína precipitada em relação à quantidade de proteína total
Quantidade de proteína total
(mg/ml)
Quantidade de proteína precipitada
(mg/ml)
F10x
% prot precipitada em relação ao total
100%
68,7
30%
38,95
56,69%
40%
40,4
58,81%
Verificou-se apenas um ligeiro aumento na concentração de proteína precipitada entre a