Reações de precipitação de proteínas
Instituto de Ciências Biológicas
Relatório de aula pratica de bioquímica
Reações de precipitação de proteínas
Acadêmica: Luana Lorraine Paulina da Silva.
Goiânia, 2015.
INTRODUÇÃO
O que são proteínas? De acordo com LEHNIGER (2002)³, proteínas são polímeros resultantes da desidratação de aminoácidos onde os mesmos se ligam aos seus vizinhos através de uma ligação covalente; são também as macromoléculas que se encontram em mais abundância em células vivas. Estas macromoléculas estão presentes em todas as partes da célula. Ainda de acordo com o autor, as proteínas são como instrumentos moleculares onde as informações genéticas são expressas.
As proteínas possuem suas conformações bem definidas. As mesmas são sensíveis a ações como a do calor que bagunça as suas cadeias peptídicas e esta desorganização recebe o nome de desnaturação. SOUZA e NUNES².
Neste relatório será exposto sobre as reações de precipitação com desnaturação de proteínas pelo calor, adição de acetato de chumbo, álcool absoluto, ácido tricloroacético (reagente dos alcalóides) e reação de precipitação sem desnaturação “salting-in” e “salting-out”.
Ao final deste será verificado se será de fácil entendimento para os alunos e os mesmos deveram estar apto a observar a perda de solubilidade da proteína (precipitação), passando ou não pelo processo de desnaturação completa.
METODOLOGIA
Materiais
Pipetas de 1mL, 2mL, 5mL;
6 Tubos de ensaio;
Banho-maria 100°C;
Agitador de tubos (vórtex);
Água destilada;
Clara de ovo diluída 4 vezes em NaCl 0,1%;
Ácido tricloroacético a 10%;
Acetato de chumbo a 10%;
Álcool etílico absoluto;
Cloreto de sódio 1,0 mol/L;
Solução saturada de sulfato de amônio (60%);
Métodos.
1. No tubo de ensaio A colocar 2mL da solução de clara de ovo e aquecer em banho-maria (2 a 3 minutos).
2. No tubo de ensaio B colocar 1 mL de solução de clara de ovo e 1mL de acetato de chumbo a 5%.
3. No tubo de ensaio C colocar 1mL de solução de clara de