ninhidrina e biureto

CURSO: TURNO:
DISCIPLINA: Bioquímica (Prática)
PROFESSOR: Cíntia Mara Ribas de Oliveira
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TURMA:_____ DATA:_____________

2 PROTEÍNAS: Reações de coloração e precipitação

2.1 Objetivos: - caracterizar a presença de proteínas em material biológico; - verificar experimentalmente a precipitação de proteínas com e sem desnaturação; - relacionar as observações práticas com a teoria acerca do conteúdo “Proteínas”.

2.2 Reações de coloração de proteínas

Devido às ligações peptídicas e à presença de diferentes aminoácidos, as proteínas reagem com uma variedade de reagentes, formando produtos coloridos. Algumas reações de coloração são específicas para alguns aminoácidos encontrados na composição de proteínas. Estas reações são importantes tanto na detecção como na dosagem de aminoácidos e proteínas em solução.
Outras reações, mais importantes, são aquelas chamadas de gerais, porque irão caracterizar grupamentos comuns a todas as proteínas, ou seja, grupos amino e ligações peptídicas.

A) Reação da Ninhidrina
Reativos
Solução de ninhidrina a 0,1% em tampão fosfato
10 mM, pH 7,0.
Solução de proteínas: clara de ovo a 10% v/v em solução salina [NaCl 0,9 g% (p/v)] ou tampão fosfato 10mM, pH 7,0.
Soluções diluídas do aminoácido glicina e do iminoácido prolina.
Técnica
A1) Em um tubo de ensaio, pipetar 1 mL da solução de ninhidrina, juntar 3 gotas de água destilada e ferver durante 2 minutos. Observar o resultado.

A2) Em um tubo de ensaio, pipetar 1 mL da solução de ninhidrina, juntar 3 gotas da solução do aminoácido glicina e ferver durante 2 minutos. Observar e anotar o resultado, comparando com o tubo A1.
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A3) Em um tubo de ensaio, pipetar 1 mL da solução de ninhidrina, juntar 3 gotas da solução do