Método de coloração Gram

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SUMÁRIO
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1. OBJETIVOS 3
2. INTRODUÇÃO 3
3. PROCEDIMENTOS 4
3.1 COLORAÇÃO SIMPLES: 4
3.2. COLORAÇÃO DIFERENCIAL: 4
4. REAGENTES UTILIZADOS 5
5. MATERIAIS UTILIZADOS 5
6. PREPARAÇÃO DO ESFREGAÇO E FIXAÇÃO DA AMOSTRA PARA COLORAÇÃO 5
7. MÉTODO DE COLORAÇÃO SIMPLES 6
7.1. CONCLUSÃO 6
8. COLORAÇÃO PELO MÉTODO DE GRAM 6
8.1. CONCLUSÃO 7

1. OBJETIVOS

Diferenciar bactérias com diferentes estruturas de parede celular a partir de colorações que estas adquirem após o tratamento com agentes químicos específicos.

2. INTRODUÇÃO

Coloração de Gram é uma técnica de coloração para diferenciação de microorganismos através das cores, para serem observados em microscópio óptico. A técnica recebeu este nome em homenagem ao médico dinamarquês Hans Cristian Joaquim Gram.
Por volta de 1884, Hans Gram observou que as bactérias, após serem tratadas com diferentes corantes, adquiriram cores diferenciadas. Assim, as que ficavam roxas foram classificadas de Gram-positivas, e as que ficavam vermelhas, foram chamadas de Gram-negativas. A técnica de Gram é fundamental para a taxonomia e identificação das bactérias, sendo muito utilizada atualmente, como técnica de rotina em laboratórios de bacteriologia.
Os resultados após a coloração de Gram permitem classificar as bactérias em dois grupos:

Quando as estruturas celulares são cobertas pelo corante violeta-de-metila, todas se coram em roxo. Com a adição do mordente (Soluto de Lugol), ocorre à formação do complexo iodo-pararosanilina, que tem como propriedade fixar o corante primário nas estruturas coradas.
Algumas estruturas perdem a cor violeta rapidamente, quando ocorre a lavagem, com ácool etílico, enquanto outras perdem sua coloração mais devagar ou a perdem completamente. O corante safranina colore novamente as estruturas que foram descoradas.
As bactérias Gram-positivas, que têm a parede celular composta por mureína (peptídeoglicano –