Coloração pelo método gram
A prática realizada consiste em um método de coloração. Em 1885, o patologista dinamarquês Hans Christian Joachim Gram, publicou na revista científica Fortschritte der Medizin, em Berlim, Alemanha, um método de coloração de bactérias que até hoje vem sendo utilizado para fins de classificação de micróbios. A idéia da técnica surgiu enquanto o pesquisador examinava o tecido pul¬monar de pacientes que haviam morrido com pneumonia. Ele percebeu que alguns dos corantes utilizados eram retidos, preferencialmente, pelas células bacterianas. A técnica foi gradativamente aperfeiçoada pela adição de outras etapas de coloração
● OBJETIVOS:
- Apresentar provas da existência de micróbios intimamente associados aos tecidos de nosso corpo. - Apresentar uma forma de coloração que permita diferenciar células bacterianas de acordo com as características de suas estruturas de superfície. - Entender a seqüência dos procedimentos da coloração de Gram e os princípios físico-químicos que regem cada um desses procedimentos.
● MATERIAIS:
Para desenvolver esta atividade, usamos:
- hastes flexíveis com ponta de algodão (cotonetes);
- lâmina de vidro para microscopia;
- fita crepe;
- solução de cristal violeta;
- solução de fuscina;
- lugol (solução de iodo);
- álcool;
- recipiente descartável para recolher os resíduos de corante (lata de achocolatado);
- frasco com água;
- lamparina a álcool;
- óleo para imersão;
- microscópio óptico;
● METODOLOGIA:
* Primeira parte da aula prática:
Separamos a turma em grupos de três pessoas, cada grupo com uma lâmina de vidro para microscopia. Primeiro desengorduramos a lâmina com álcool, e logo após marcamos um lado da lâmina com um pequeno pedaço de fita crepe (apenas para identificação de face). A face marcada será contrária àquela do esfregaço.
Um integrante do grupo esfregou firmemente a ponta de algodão da haste flexível entre os dentes e a gengiva, fazendo o esfregaço no