Exercícios sobre texto de insulina

Exercícios do texto “ A produção de insulina humana por ENGENHARIA GENÉTICA”

1 – Descreva quais são os elementos genéticos necessários para a construção de um vetor de expressão em bactéria. São necessários: uma região para replicação estável e controle de número de cópias; um marcador seletivo, um promotor para iniciação da transcrição e seu controle; uma região terminadora da transcrição, um sítio de ligação de ribossomos para iniciação da tradução em uma trinca ATG apropriada; e uma região de sítios apropriados para enzimas de restrição.

2 – Defina as seguintes estruturas genéticas:
a) plasmídio - moléculas circulares duplas de DNA capazes de se reproduzir independentemente do DNA cromossómico
b) cDNA - é o DNA sintetizado a partir de uma molécula de RNA mensageiro (DNA complementar)
c) terminador Rho-dependente – necessita de uma proteína auxiliar para a parada da transcrição (Rho)
d) terminador Rho-independente - terminação da cadeia cabe totalmente à RNA polimerase, não dependendo de proteínas auxiliares
e) origens de replicação - regiões específicas na sequência de moléculas de DNA, onde determinadas proteínas se ligam para abrir a dupla hélice
f) reação de PCR - método de amplificação, criação de muitas cópias, de DNA sem o uso de um organismo vivo
g) promotor - região reguladora que atua como local de ligação da RNA polimerase
h) íntron e éxon - Íntrons são regiões não-codificantes do RNAm e os éxons são regiões codificantes do RNAm
i) sítio de restrição - local onde a molécula de DNA é clivada pela enzima de restrição
j) expressão heteróloga – é quando uma proteína é experimentalmente colocada em uma célula que normalmente não expressa à proteína

3 – Explique o mecanismo de processamento da pré-pró-insulina até o estágio de insulina.
A insulina é produzida sob a forma de um único polipeptídeo, a pré-pró-insulina, com uma cadeia de 110 aas. Os 24 primeiros formam o peptídeo sinal,