relatório de genetica

envolve lise celular, com libertação de todo o material intracelular, e purificação do ADN. O processo de rompimento das células é a parte do protocolo que mais varia se compararmos os diferentes processos de extração de diferentes materiais biológicos: bactéria, levedura, células vegetais, células animais, etc. Com a lise celular são libertados para a solução, todos os compostos intracelulares: proteínas, lípidos, polissacarídeos, ácidos nucleicos, moléculas orgânicas de baixo peso molecular e iões. Um dos processos de rompimento da célula é o mecânico, que consiste na agitação forte por centrifugação. Duma maneira geral, os protocolos com rompimento enzimático dão origem a ADN de maior peso molecular e apropriado para a clonagem e construção de bancos genómicos. Neste caso, emprega-se um detergente (SDS) para completar a lise, desnaturando as proteínas e solubilizando os lípidos. Assim, a purificação do ADN consistirá em libertar o ADN de todos os compostos referidos, o que é feito usualmente por precipitações diferenciais e ação de enzimas específicas como por exemplo proteases e RNases. Nas precipitações diferenciais, recorre-se, geralmente, à mistura fenol/clorofórmio/álcool isoamílico em que o fenol e clorofórmio desnaturam as proteínas, ficando estas solubilizadas na fase fenólica que se separa com maior eficácia da fase aquosa por ação do clorofórmio e álcool isoamílico. Os passos posteriores de purificação baseiam-se na insolubilidade do ADN em etanol na…

DE PURIFICAR PESQUISA PROTEÍNAS Uma nova tecnologia cromatográfica para uso biotecnológico Paulo Lee Ho Centro de Biotecnologia, Instituto Butantan Pleehoib@quim.iq.usp.br Érika Kitahara Amersham Pharmacia Biotech do Brasil Diogo M.O. Ogawa Centro de Biotecnologia, Instituto Butantan Álvaro R. B. Prieto da Silva Centro de Biotecnologia, Instituto Butantan Celso Raul Romero Ramos Centro de Biotecnologia, Instituto Butantan Ana Lúcia Tabet…

Alan McBride Proteômica Biotecnologia, CDTec, UFPel • A cromatografia é uma técnica de separação baseada na distribuição dos componentes de uma mistura entre um fluido (fase móvel ou eluente) e um adsorvente (fase estacionária). • A fase estacionária pode ser um sólido ou um líquido depositado num sólido inerte, empacotado numa coluna ou espalhado por uma superfície formando uma camada fina. Cromatografia Cromatografia Sistemas de cromatografia e suas aplicações…

conjunto de ensaios laboratoriais os quais tiveram como objectivo a extracção, purificação, concentração e quantificação do DNA plasmídeo/vector de clonagem (pUC19) de uma estirpe de Escherichia coli. Este último constitui, por assim dizer o objectivo principal de todo o trabalho, já que as todas etapas anteriores foram realizadas com a finalidade de visualisarmos o DNA e de quantificarmos o seu tamanho. Para isso, realizaram-se os seguintes trabalhos/etapas:  TP1: Extrair,…

Em um anti-soro ordinário, feito contra tal mistura, a proporção de moléculas de anticorpo, que reconhecem o componente minoritário, seria muito pequena para este poder ser utilizado. Entretanto, se os linfócitos B, que produzem os vários componentes deste anti-soro são feitos em hibridomas, torna-se possível procurar clones individuais de hibridomas a partir da mistura, para selecionar aquele que produz o tipo desejado de anticorpo monoclonal e propagar o hibridoma selecionado…

substâncias;  Presença de duas fases: Estacionária e móvel;  Separação ocorre devido a diferença entre as substâncias e suas fases; Figura 1. Cromatografia de Papel.  Pode ser uma análise qualitativa e quantitativa. 2 Histórico  Mikhail Semenovich Tswett (1872-1919) inicia os estudos sobre cromatografia;  1899 à 1901 - Primeira pesquisa com a estrutura físico-química da clorofila das plantas;  1906 no seu segundo trabalho surge o…

ABRAHAM DAMIAN GIRALDO ZUÑIGA ESTRATÉGIA DE PURIFICAÇÃO DAS PROTEÍNAS α-LACTOALBUMINA E βLACTOGLOBULINA DO SORO DE QUEIJO Tese apresentada à Universidade Federal de Viçosa, como parte das exigências do Programa de Pós-Graduação em Ciência e Tecnologia de Alimentos, para obtenção do título de Doutor Scientiae. VIÇOSA MINAS GERAIS - BRASIL 2003 ABRAHAM DAMIAN GIRALDO ZUÑIGA ESTRATÉGIA DE PURIFICAÇÃO DAS PROTEÍNAS α-LACTOALBUMINA E β-LACTOGLOBULINA DO SORO DE QUEIJO …

Extracção, Quantificação e Análise de Integridade de DNA FCT /UNL, DCV, TLBII 2013-2014 Extracção, Quantificação e Análise de Integridade de DNA FCT /UNL, DCV, TLBII Catarina Borges, Inês Barroso, Sara Garcia Abstract The objective of the following report was the extraction, quantification and analysis of the plasmid DNA in order to know about it’s purity. The extraction was achieved by the alkaline lysis method, the analysis was made by agarose gel 1.2 %…

Ichikawa RA: 121051218 Purificação de proteína Curso de Ciências Biológicas Ilha Solteira, 2015 INTRODUÇÃO As proteínas são macromoléculas biológicas constituídas por uma ou mais cadeias de aminoácidos, estão presentes em todos os seres vivos e participam em praticamente todos os processos celulares, desempenhando um vasto conjunto de funções no organismo, como a replicação de ADN, a resposta a estímulos e o transporte de moléculas. Muitas proteínas são enzimas que…

aplicado para determinar a concentração de proteínas totais em diversos meios, sendo eles: soro ou plasma sanguíneo, líquido cérebro espinhal, urina, alimentos, saliva, fibrinogênio e tecido animal. Interferência de substancias que possam reagir com os íons de cobre. MÉTODO DE LOWRY Tem alta sensibilidade, utilizado para determinação da concentração de proteínas totais em diversos meios sendo eles: líquor, plasma sanguíneo, saliva humana, tecido animal, plantas, suco biliar, membranas,…