Zimograma
Instituto de Ciências Biológicas
Universidade Federal de Minas Gerais http://www.icb.ufmg.br/mic Zimograma
Introdução
A fermentação de carboidratos é amplamente utilizada para a diferenciação de gêneros e identificação de espécies bacterianas e algumas espécies de fungos leveduriformes. A prova consiste em verificar a capacidade do microrganismo fermentar ou não um determinado carboidrato, permitindo assim verificar as suas características que auxiliarão na identificação.
Esta prova pode ser realizada de várias maneiras. A mais usual envolve a utilização de um meio com glicose ou outro açúcar e/ou álcool com pH neutro e um indicador de pH (Indicador de Andrade, púrpura de bromocresol). Além disso, utiliza-se um tubo de Durham, invertido, imerso no meio. O meio é inoculado com a cultura teste e incubado. A prova positiva é indicada pela mudança da cor do meio de incolor com Indicador de Andrade ou púrpura de bromocresol, para vermelho ou amarelo, respectivamente, devido a produção de ácidos, com redução do pH do meio. Além disso, se a bactéria possuir o sistema enzimático hidrogênio-fórmico-liase, o ácido fórmico é transformado em CO² e Hidrogênio, os quais são coletados pelo tubo de Durham, expulsando o meio e ficando a extremidade superior desse tubo transparente, cheia dos gases citados.
A prova negativa é evidenciada pela ausência de mudança de cor ou até mesmo pela acentuação da cor púrpura quando o reativo é o púrpura de bromocresol, indicando utilização dos aminoácidos, com alcalinização do meio. Deve-se lembrar que, para produzir esse meio bem como aquele usado para pesquisa da produção de urease, os açúcares e a uréia devem ser esterilizados previamente por filtração e, posteriormente, colocados assepticamente no meio básico. Enterobactérias produzem ácido e gás à partir da glicose (exceto Shigella, que só produz ácido). As espécies do gênero Pseudomonas não fermentam carboidratos. Algumas vezes é necessário verificar se a