Lista - cinética enzimática

UNIVERSIDADE ESTADUAL DO CENTRO-OESTE DEPARTAMENTO DE ENGENHARIA DE ALIMENTOS Disciplina: ENGENHARIA BIOQUÍMICA Professora: Michele C. Mesomo Ano: 2011

Lista 2 – Cinética Enzimática
1. Determine km e Vmax de uma reação enzimática caracterizada pela tabela abaixo: S(mol/L) 4,1 x 10-3 9,5 x 10-4 5,2 x 10
-4 -4

V(mol x L-1 x min-1 x 106) 177 173 125 106 80 67 43

1,03 x 10

4,9 x 10-5 1,06 x 10-5 5,10 x 10
-6

a) usando o gráfico de Lineweaver – Burk b) usando o gráfico de Eadie – Henes c) usando o gráfico de Hanes-Woolf 2. Ache uma expressão para a velocidade de reação v em termos de S, Vmax, Km e Ki, para uma reação enzimática com inibição pelo substrato.
K1

K3

E+S

↔ ES
K2

ES + S ↔ ESS
K4

K5

ES →EP

Nota: Assumir K5 muito pequeno em relação a K1, K2, K3 e K4 3. Os dados abaixo foram obtidos de uma reação enzimática simples do tipo
E

S →
a. Estime os valores de Vmax e Km.

P

b. Qual seria o valor da velocidade para a concentração de substrato igual a 2,5 x 10-5M? c. Qual seria o valor da velocidade para a concentração de substrato igual a 5.10-5M, se a concentração de enzima é dobrada? [S] (M) 6,25 x 10
-6

V (mol/L.mim) 15,0 56,25 60,0 74,9 75,0
-5 -1

7,50 x 10-5 1,0 x 10-4 1,0 x 10 1,0 x 10
-3 -2

Resposta: a) Vmax = 75,188mol/L.min e Km = 2,512 x 10 min b) V = 37,504mol/L.min c) V = 100,00 mol/Lmin

4. Uma enzima tem um Km de 4.7 x 10-5 M. Se a Vmax da preparação é de 22 nmol/L.min, que velocidade pode ser observada na presença de 2 x 10-4M de substrato e 5 x 10-4M de: a. Um inibidor competitivo b. Um inibidor não-competitivo Dado: Ki em ambos os casos é de 3 x 10-4M
Resposta: a) V= 1,3525 x 10 mol/L.min b) V= 6,680 x 10 mol/L.min
-9 -8

5. Com o intuito de caracterizar uma enzima isolada em laboratório, realizaram-se experiências a temperatura de 35oC e pH 6,5 constantes e anotando-se a velocidade inicial de transformação do substrato a diferentes concentrações iniciais do mesmo. A tabela abaixo