Engenharia bioquimica

UNIVERSIDADE DO SUL DE SANTA CATARINA UNIDADE TECNOLÓGICA
CURSO: ENGENHARIA QUÍMICA

DISCIPLINA: Engenharia Bioquímica
Lista de exercícios – 1 (Unidade 2)

1. Determine Km e Vmax de uma reação enzimática caracterizada pela tabela abaixo:

S(mol/L) | V(mol x L-1 x min-1 x 106) | 4,1 x 10-3 | 177 | 9,5 x 10-4 | 173 | 5,2 x 10-4 | 125 | 1,03 x 10-4 | 106 | 4,9 x 10-5 | 80 | 1,06 x 10-5 | 67 | 5,10 x 10-6 | 43 |

a) usando o gráfico de Lineweaver-Burk;Vmáx = 131,58; Km = 10E-6. b) usando o gráfico de Hanes-Woolf;Vmáx = 178,58; Km = 7E-6. c) usando o gráfico de Eadie-Hofstee.Vmáx = 9E6; Km = 5,5E+4.

Na sua opinião, quais são os resultados mais confiáveis? Porque?
b) Hanes-Woolf: Vmáx + próximo do maior valor experimental (177E+6) e r ~ +1,0 (0,9976).

2. O mecanismo de reações catalisadas por enzimas é frequentemente estudado por fazer medições cinéticas em sistemas de reação enzima-substrato. O que indica a área destacada no gráfico (C x t). Justifique sua resposta.

Fonte: CANDURI, 2011.

R.: Indica a fase estacionária (cinética de ordem zero). A velocidade máxima, Vmáx, ocorre a elevadasconcentrações de substrato, na qual a enzimaestá saturada, ou seja, inteiramente na formaES. Após a mistura da enzima com o substrato ocorre a formação do complexo ES, que permanece numaconcentração constante, ou seja:

A transformação de ES em E + P será a etapa limitante do processo, ou seja:

Da mesma forma, se toda a enzima estiver participando da reação, então a velocidade de reação estará no seu máximo, ou seja:
*Eo = Et

3. O modelo de Michaelis-Menten é um modelo cinético mais simples. Com base neste modelo, responda: a. A partir do mecanismo da reação enzimática, explique o comportamento cinético proposto. R.:

Segundo Michaelis-Menten, quando se mistura enzima mais substrato, a formação do complexo ES é imediata, e este imediatamente se rompe, havendo a formação do produto e