Discussão
As enzimas tem sua ação influenciada pelo pH e pela temperatura. Nos experimentos, analisou-se influência de cada um separadamente, como descrito a seguir.
Experimento 1
Seguiu-se o protocolo especificado abaixo:
Reativos
1
2
3
4
5
6
7
8
Tampão citrato-fosfato 0,05M pH 2,0
1,0
1,0
--
--
--
--
--
--
Tampão acetato 0,05M pH 4,0
--
--
1,0
--
--
--
--
Tampão acetato 0,05M pH 5,0
--
--
--
1,0
--
--
--
--
Tampão fosfato 0,05M pH 6,0
--
--
--
--
1,0
--
--
--
Tampão fosfato 0,05M pH 7,0
--
--
--
--
--
1,0
--
--
Tampão fosfato 0,05M pH 8,0
--
--
--
--
--
--
1,0
--
Tampão bicarbonato 0,05M pH 9,0
--
--
--
--
--
--
--
1,0
Água destilada (mL)
1,0
0,8
0,8
0,8
0,8
0,8
0,8
0,8
Sacarose 0,2M (mL)
0,5
0,5
0,5
0,5
0,5
0,5
0,5
0,5
Invertase 0,1mg/mL (mL)
--
0,2
0,2
0,2
0,2
0,2
0,2
0,2
Incubação: 25º C (temperatura ambiente) durante 5 minutos
ADNS (mL)
1,0
1,0
1,0
1,0
1,0
1,0
1,0
1,0
Aquecer a 100ºC durante 5 minutos
Água destilada (mL)
6,5
6,5
6,5
6,5
6,5
6,5
6,5
6,5
Tabela: Protocolo do experimento 1.
Realizado o protocolo, obtiveram-se os seguintes resultados de Absorbância, demonstrados na tabela abaixo:
RESULTADOS
(Absorbância)
Tubos
1
2
3
4
5
6
7
8
0
0,043
0,228
0,672
0,053
0,162
0,132
0,005
Tabela: Absorbâncias obtidas no experimento 1
Á partir dos dados obtidos, esboçou-se o seguinte gráfico, de pH x Absorbância:
Gráfico: pH X Absorbância
Observamos que a absorbância foi maior no tubo 4, demonstrando que a enzima Invertase agiu de forma mais eficiente neste tubo, de pH 5,0 e temperatura ambiente (25ºC). Á partir do gráfico observamos a curva de pH da enzima invertase (temperatura constante), sendo o pH ótimo próximo a 5,0, ou seja, a enzima agirá com maior eficiência nessa faixa de pH.
Experimento 2 Seguiu-se o protocolo especificado abaixo:
Reativos
Tubos
1
2
3
4
5
Tampão acetato