Cromatrografia
Centro de Ciências da Natureza- CCN
Curso de Licenciatura Plena em Ciências Biológicas
Disciplina: Bioquímica
Profª: Renata Paiva
Relatório da aula prática sobre Cromatografia
Juliana Pereira da Silva
Teresina
Maio/2013
1.OBJETIVO
O objetivo da presente prática é desenvolver um estudo da cromatografia ascendente em papel, separar os componentes (corantes) das tintas do conjunto de canetas, interpretar os dados experimentais e estimar a partir de critérios estabelecidos, o fator de retenção da amostra com o intuito de identificar os compostos.
2.FUNDAMENTAÇÃO TEORICA
A cromatografia em papel é uma técnica simples, utiliza pequena quantidade de amostra, tem boa capacidade de resolução e aplica-se, de preferência, na separação e identificação de compostos polares. É classificada como cromatografia por partição, em razão de a fase estacionária e a fase móvel serem líquidas. A separação dos componentes de uma mistura, relaciona-se com as diferentes solubilidades relativas desse compostos nas fases móvel e estacionária. É uma técnica muito útil para a separação de componentes de uma mistura e realização de sua análise qualitativa em função dos Rf (fatores de retardamento) e das cores apresentadas.
A forma mais simples da cromatografia em papel é a cromatografia ascendente, que utiliza uma tira de papel de comprimento e largura variáveis em função da cuba cromatográfica a ser utilizada. Marca-se com lápis o ponto de partida da amostra, a cerca de 1 cm de uma das bordas, marca-se também a linha de chegada da fase móvel, geralmente 10 cm do ponto de partida. Por capilaridade, a fase móvel começa a se movimentar em fluxo ascendente, no início rapidamente, diminuindo de modo gradativo e podendo até parar por completo quando a força ascendente da capilaridade for neutralizada pela ação da gravidade.
A análise qualitativa de uma substância realiza-se através da cor da macha e de seu fator