Análise de DNA Por Eletroforese em Gel de Agarose

Análise de DNA Por Eletroforese em Gel de Agarose INTRODUÇÃO As endonucleases de restrição, ou enzimas de restrição, tem a função de clivagem (corte) da molécula de DNA em um determinado ponto especifico, em reconhecimento a determinadas sequencias de nucleotídeos. Estas sequencias são de 4 a 8 nucleotídeos, havendo algumas enzimas que reconhecem sequencias maiores que estas. O DNA formado a partir destas enzimas de restrição possui variados tamanhos. A técnica de separação dos fragmentos de DNA mais utilizada é a eletroforese através de géis de agarose. A eletroforese é uma técnica baseada na separação de partículas, que ocorre quando as mesmas são dissolvidas ou suspensas em um íon positivo, através do qual uma corrente elétrica é aplicada. Esta técnica consiste também na migração de moléculas ionizadas, em solução, de acordo com suas cargas elétricas e pesos moleculares em campo elétrico. Moléculas com carga negativa migram para o pólo positivo (ânodo) e moléculas com carga positiva migram para o pólo negativo (cátodo). A agarose é um polissacarídeo que dissolve em água fervente e então gelifica quando esfria, e vira como a gelatina. Para realizar uma eletroforese, é preparado um gel de agarose, o DNA é introduzido em pequenos poços de gel, e então uma corrente elétrica é aplicada através do gel. Como o DNA é negativamente carregado, ele é atraído pelo eletrodo positivo. Entretanto, dependendo do método utilizado para a visualização do DNA, o gel de…

CARMEN LUCIA ROCHA UTILIZAÇÃO DA ANÁLISE DO PERFIL DE FRAGMENTAÇÃO DO DNA GENÔMICO POR ELETROFORESE EM GEL DE CAMPO PULSADO PARA AUXILIAR NA INTERPRETAÇÃO DO ENSAIO DE ESTERILIDADE MESTRADO PROFISSIONAL PPGVS/NCQS FIOCRUZ 2008 UTILIZAÇÃO DA ANÁLISE DO PERFIL DE FRAGMENTAÇÃO DO DNA GENÔMICO POR ELETROFORESE EM GEL DE CAMPO PULSADO PARA AUXILIAR NA INTERPRETAÇÃO DO ENSAIO DE ESTERILIDADE Carmen Lucia…

O que é eletroforese e para que é usada? ABR 10 Publicado por Moderador Gel de eletroforese. Note as bandas marcadas (Foto: PNNL - Pacific Northwest National Laboratory) A eletroforese em gel é uma técnica usada para separar moléculas com tamanhos e cargas diferentes. Ela é bastante útil quando queremos analisar o tamanho das moléculas obtidas ou checar o resultado de uma amplificação de DNA. Basicamente consiste em aplicar um gel que servirá como matriz (algo semelhante à…

ELETROFORESE A Eletroforese, ferramenta amplamente utilizada no meio científico, é uma técnica baseada na separação de partículas em um determinado gel de acordo com sua massa e carga.. A eletroforese pode ser utilizada para separação de diversas moléculas orgânicas, como lipoproteínas, proteínas, RNA e DNA. O princípio da eletroforese utilizada para separação de DNA se baseia na carga negativa global de uma fita de DNA. Portanto, íons livres , moléculas de DNA ou fragmentos de DNA em…

ELETROFORESE Aline Marin, Bárbara Gomes, Bruna Girardi e Ethiane Mezadri Santa Maria, RS, Brasil 2009 ELETROFORESE A eletroforese é uma técnica baseada na separação de partículas, que ocorre quando as mesmas são dissolvidas ou suspensas em um eletrólito, através do qual uma corrente elétrica é aplicada. É também usada na identificação de substâncias, no estudo de homogeneidade de sistemas biológicos e na determinação…

ELETROFORESE A eletroforese é o termo que referencia a migração de uma molécula carregada sob a influência de um campo elétrico. Algumas moléculas como os aminoácidos, peptídeos, proteínas, nucleotídeos e ácidos nucleicos se tornam ionizáveis a partir de certo grau de PH, fazendo com que estas moléculas obtenham cargas positivas e negativas que serão capazes de se separar pela influencia de um campo eletromagnético. No sistema de eletroforese ilustrado na figura xxxx, uma amostra de…

ELETROFORESE A eletroforese em gel de agarose consiste no método padrão usado para separar, identificar, analisar, caracterizar e purificar fragmentos de DNA. A eletroforese em gel de acrilamida é usada em menor escala. A técnica é simples, rápida e capaz de separar misturas de fragmentos de DNA que não podem ser separados por outros métodos, tais como centrifugação com densidade de gradiente ou por velocidade de sedimentação. A localização do DNA no gel pode ser determinada…

INTRODUÇÃO Extração de DNA A extração de DNA é o primeiro passo para utilizá-lo em técnicas moleculares. Assim sendo, a qualidade e integridade do DNA são fundamentais para o sucesso nas etapas posteriores. Existem diferentes protocolos de extração de DNA que variam em função da espécie e do tecido a ser utilizado. A maneira de coletar e acondicionar o tecido, assim como o estado do mesmo é fundamental para o sucesso da extração. Um dos aspectos importantes é que a quantidade de DNA…

relatorio de extração de Dna em eletroforeseDiscussão: O DNA tem carga elétrica negativa, então quando submetido a um campo elétrico ele migrará para o pólo positivo. O tamanho do DNA determina a taxa na qual ele passa através do gel, permitindo uma separação efetiva de mistura de fragmentos. De modo geral os fabricantes de cubas sugerem valores ideais em volts, que variam na faixa de 50 a 150V, dependendo do tamanho da cuba (8 a, 10v por cm). O brometo de etidium intercala-se com a…

UNIVERSIDADE FEDERAL DO PIAUÍ – UFPI BACHARELADO EM BIOMEDICINA RELATÓRIO DE AULA PRÁTICA EXTRAÇÃO DE DNA E ELETROFORESE LUCAS BRITO; RAYARA MARQUES; SANSARA SANNY; TEREZA CRISTINA E THIAGO LOPES. PARNAÍBA 2010 LUCAS BRITO; RAYARA MARQUES; SANSARA SANNY; TEREZA CRISTINA E THIAGO LOPES. RELATÓRIO DE AULA PRÁTICA EXTRAÇÃO DE DNA E ELETROFORESE Relatório apresentado ao curso de Bacharelado em Biomedicina da Universidade Federal do Piauí - UFPI, para a obtenção de nota, sob…