Relatorio Estra O De Dna 1
Introdução -------------------------------------------------------------------------- pág. 3
Material e métodos ---------------------------------------------------------------- pág. 4
Resultados e discussões ---------------------------------------------------------- pág. 5
Conclusão -------------------------------------------------------------------------- pág. 6
Anexos ------------------------------------------------------------------------------ pág. 7
Referências bibliográficas ------------------------------------------------------- pág. 9
INTRODUÇÃO
Extração de DNA
A extração de DNA é o primeiro passo para utilizá-lo em técnicas moleculares. Assim sendo, a qualidade e integridade do DNA são fundamentais para o sucesso nas etapas posteriores. Existem diferentes protocolos de extração de DNA que variam em função da espécie e do tecido a ser utilizado. A maneira de coletar e acondicionar o tecido, assim como o estado do mesmo é fundamental para o sucesso da extração. Um dos aspectos importantes é que a quantidade de DNA necessária varia em função da técnica molecular a ser utilizada. No caso de uma reação de RAPD (Random Amplified Polymorphic DNA), por exemplo, são necessários somente alguns nanogramas de DNA, e para análise de RFLP (Restriction Fragment Length Polymorphism) são necessárias quantidades de DNA na ordem de microgramas.
Normalmente os componentes da solução extratora variam de acordo com o protocolo utilizado, sendo que cada solução deve conter um tampão para estabilizar o pH, um sal para dissocia as proteínas, um detergente para solubilizar as membranas e um agente inativante das DNAses cuja função é proteger o DNA genômico.
Após a extração, torna-se necessário quantificar o DNA para verificar a quantidade e a ocorrência de degradação no mesmo. Entre as técnicas disponíveis para estimar a concentração de DNA, as mais utilizadas são a leitura em espectrofotômetro e a análise comparativa em gel