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relatorio de extração de Dna em eletroforeseDiscussão:
O DNA tem carga elétrica negativa, então quando submetido a um campo elétrico ele migrará para o pólo positivo. O tamanho do DNA determina a taxa na qual ele passa através do gel, permitindo uma separação efetiva de mistura de fragmentos.
De modo geral os fabricantes de cubas sugerem valores ideais em volts, que variam na faixa de 50 a 150V, dependendo do tamanho da cuba (8 a, 10v por cm).
O brometo de etidium intercala-se com a molécula de DNA a cada 2,5 bp do fragmento, após sua inserção esse exerce uma ligação do tipo van der Waals. A radiação UV é capaz de estimular essa ligação entre o DNA e o corante tornando a molécula ou banda visível no gel através de um dispositivo de transiluminação. Alguns fatores determinam a migração do DNA através do gel de agarose:
a) tamanho da molécula de DNA
b) concentração da agarose
c) conformação do DNA (formas circulares ou não lineares: I; II e II I)
d) a presença de brometo de etidium no gel
e) voltagem aplicada
f) tipo de agarose
g) tipo do tampão de eletroforese
O DNA permanece intacto durante o processo de eletroforese, podendo ser eluido do gel e utilizado em outros procedimentos como clonagem, preparação de sondas,construção de bibliotecas, etc.
Discussão:
O DNA tem carga elétrica negativa, então quando submetido a um campo elétrico ele migrará para o pólo positivo. O tamanho do DNA determina a taxa na qual ele passa através do gel, permitindo uma separação efetiva de mistura de fragmentos.
De modo geral os fabricantes de cubas sugerem valores ideais em volts, que variam na faixa de 50 a 150V, dependendo do tamanho da cuba (8 a, 10v por cm).
O brometo de etidium intercala-se com a molécula de DNA a cada 2,5 bp do fragmento, após sua inserção esse exerce uma ligação do tipo van der Waals. A radiação UV é capaz de estimular essa ligação entre o DNA e o corante tornando a molécula ou banda visível no gel através de um dispositivo de