ESCOLA SUPERIOR DA AMAZ NIA

ESCOLA SUPERIOR DA AMAZÔNIA CURSO DE BIOMEDICINA REAÇÃO EM CADEIA DA POLIMERASE - PCR ANDRÉIA CHAVES EVELYN BELTRÃO OLIVEIRA MONTEIRO LETICIA MENEZES DE ALMEIDA RACHEL RIBEIRO DOS SANTOS BELÉM – PARÁ 2015 1.INTRODUÇÃO A Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) é uma técnica de Biologia Molecular que permite a replicação in vitro do DNA, de forma extremamente rápida. Com a PCR, sequências mínimas do material genético podem ser amplificadas milhões de vezes em poucas horas, permitindo a detecção rápida e viável dos marcadores genéticos de doenças infecciosas, doenças genéticas, e outras muitas utilidades.A PCR trabalha com o princípio natural de replicação do DNA. Consistindo em um processo de três passos básicos, que se repete em ciclos inúmeras vezes. Assim, um ciclo de PCR consiste nas seguintes etapas: Desnaturação com calor; Hibridização ou Annealing: hibridiza-se nas extremidades das sequênciaalvo primers (um em cada simples fitas produzida); Extensão: a adição da Taq polimerase na solução faz com que esta enzima inicie o processo de síntese da nova dupla fita, na região do primer,incorporando os nucleotídeos complementares. 2.MATERIAIS: Microtubos coloridos Micropipetas Enzimas (ENZ) Centrifugadora Estufa Tina de electroforese 3.MÉTODOS

ácidos nucléicos, os RNA e DNA Conceitue: - promotor: é uma região reguladora que está a uma curta distância da extremidade 5' de um gene e atua como local de ligação da RNA polimerase. - ativador: - é uma protease sérica secretada que converte a proenzima plasminogênio em plasmina, que é uma enzima fibrinolítica. O plasminogênio é sintetizado como uma cadeia única que é clivada pela t-PA na plasmina de duas cadeias ligadas por dissulfato. - repressor: O repressor age pela…

Reação em Cadeia de Polimerase Relembrando... • Características Estruturais 5´ 3´ 3´ 5´ Relembrando... • Bases da Biologia Molecular DNA Replicação Transcrição RNA Tradução Proteína Relembrando... • Replicação do DNA in vivo Extremidade 3’-OH DNA polimerase Primers Dr. Arthur Kornberg Dr. Har Gobind Khorana 1956 – Isolamento da DNA polimerase I - replicação da molécula de DNA in vitro. Nobel em 1959 Princípio:…

Prof. Msc. Gildemar José Bezerra Crispim 1 2 SUMÁRIO Biologia Molecular ...................................................................................... 3 1.Extração de DNA ..................................................................................... 5 1.1. Protocolo de extração de DNA ................................................................................. 6 3. Kit PureLink "Invitrogen"…

Introdução Após a descoberta da estrutura da dupla hélice do DNA por Watson e Crick em 1953, dos avanços na biologia molecular permitiram o desenvolvimento de tecnologias para análise do DNA entre eles a técnica da PCR. O processo da reação em cadeia da polimerase (PCR) é uma técnica poderosa, que envolve a síntese enzimática in vitro de milhões de cópias de um segmento específico de DNA na presença da enzima DNA polimerase, esse método de amplificação foi inventada por…

(H3PO4); Pentose (ribose ou desoxirribose). Os nucleotídeos podem ser: Ribonucleotídeos – quando possui hidroxilas nos carbonos 2’ e 3’ da pentose; Desoxirribonucleotídeos – quando possui apenas hidroxila no carbono 3’ da pentose; Didesoxirribonucleotídeos – quando não possui hidroxilas nos carbonos 2’ e 3’ da pentose. Bases Nitrogenadas: Possuem como principal função a ligação entre as fita de DNA por ligação de pontes de hidrogênio. Purinas ou Bases Púricas (possuem apenas…

Reação da polimerase em cadeia): Principio da PCR (Polymerase chain reaction ou Reação da polimerase em cadeia): O principal propósito da PCR é fazer um número imenso de copias de um determinado fragmento gênico, ao qual o tamanho pode variar de poucos pb (pares de bases) até milhares de pb. A técnica explora função natural da enzima chamada de taq – polimerase, extraída da bactéria Thermus aquaticus, esta enzima é semelhante à enzima DNA – polimerase que é capaz de…

SUMÁRIO 1 INTRODUÇÃO 1.1 BIOLOGIA MOLECULAR......................................................................pág 4 1.2 CITOGENÉTICA....................................................................................pág 5 2 OBJETIVOS.................................................................................................pág 6 3 BIOLOGIA MOLECULAR 3.1 EXTRAÇÃO DE DNA............................................................................pág 7 3.1.1 MATERIAL…

Técnicas em Biologia Molecular DNA recombinante; enzimas de restrição; clonagem gênica; sequenciamento; PCR; aplicações médicas DNA recombinante: o que é? • É uma molécula de DNA gerada pela união de dois pedaços DNA que não se encontram associados normalmente, em geral derivados de organismos diferentes. DNA recombinante: para que serve • Isolar um gene de interesse de estudo para conhcer sua sequência ou para expressar seu produto para fins de pesquisa ou biotecnológico • Ex:…

"Origem de Replicação". R:Origem de Replicação (ou Ori) é uma região na fita de DNA que possui características incomuns, como sequências de nucleotídeos repetidos, que são reconhecidas por um complexo enzimático e atuam como sítio de ligação para essas enzimas iniciando o processo de replicação do DNA. Uma molécula de DNA tem várias origens de replicação, algumas são escolhidas com mais frequência. Robson Henrique Sobre o modelo do DNA de Watson-Crick, é correto afirmar…