ESCOLA SUPERIOR DA AMAZ NIA

ESCOLA SUPERIOR DA AMAZÔNIA
CURSO DE BIOMEDICINA

REAÇÃO EM CADEIA DA POLIMERASE - PCR

ANDRÉIA CHAVES
EVELYN BELTRÃO OLIVEIRA MONTEIRO
LETICIA MENEZES DE ALMEIDA
RACHEL RIBEIRO DOS SANTOS

BELÉM – PARÁ
2015
1.INTRODUÇÃO

A Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) é uma técnica de Biologia Molecular que permite a replicação in vitro do DNA, de forma extremamente rápida. Com a PCR, sequências mínimas do material genético podem ser amplificadas milhões de vezes em poucas horas, permitindo a detecção rápida e viável dos marcadores genéticos de doenças infecciosas, doenças genéticas, e outras muitas utilidades.A PCR trabalha com o princípio natural de replicação do DNA. Consistindo em um processo de três passos básicos, que se repete em ciclos inúmeras vezes. Assim, um ciclo de PCR consiste nas seguintes etapas: Desnaturação com calor; Hibridização ou Annealing: hibridiza-se nas extremidades das sequênciaalvo primers (um em cada simples fitas produzida); Extensão: a adição da Taq polimerase na solução faz com que esta enzima inicie o processo de síntese da nova dupla fita, na região do primer,incorporando os nucleotídeos complementares.

2.MATERIAIS: Microtubos coloridos
Micropipetas
Enzimas (ENZ)
Centrifugadora
Estufa
Tina de electroforese

3.MÉTODOS
Alguns componentes são essenciais para que ocorra a PCR: Presença de uma DNA polimerase termoestável, como por exemplo, Taq(Termus aquaticus) a ou Tfl (T. flavus); Presença de um par de primers, oligonucleotídeos que funcionam comoponto de início da polimerização; Cátions divalentes, como MgCl2;
Deoxinucleotídeos trifosfatados (dNTPs), com quantidades iguais de dATP,dCTP, dTTP e dGTP; DNA molde, podendo ser fita simples ou fita dupla; Tampão para manutenção do