TOXICIDADE
Testes in vitro são aqueles métodos ou técnicas que podem substituir ou diminuir o número de animais nas experimentações. Estes ensaios geralmente precedem os testes in vivo e identificam bem o principio dos 3Rs, que são a substituição (replacement) de experimentos que utilizam animais por outros que não necessitam, a redução (reduction) do número de animais e o refinamento (refinement) com a diminuição da severidade dos processos (REPETTO, 1995). Os estudos in vitro vêm sendo utilizado com mais frequência, devido ao grande rigor nos laboratórios com o uso de animais devido a questões éticas.
O ensaio de letalidade frente à artemia salina, uma espécie de invertebrado marinho (SANCHEZ FORTUN et al., 1995), é uma metodologia in vitro extensamente utilizada na linha de pesquisa de compostos químicos e extratos de plantas para avaliar seu potencial tóxico. O ensaio tem como vantagem serrápido,simples, de fácil domínio, acessível economicamente e utilizar pouca quantidade de amostra (GUISALBERTI, 2008).
O bioensaio de artemias salinas permite determinar a toxicidade de determinada substância por meio da estimativa da Concentração letal média (CL50), que é definida como a concentração de uma substância química que provoca a morte de 50% de um grupo de animais expostos, em um período de tempo definido (LEWAN et al., 1992).
1.1.2 Toxicidade aguda
A avaliação de toxicidade aguda é uma metodologia amplamente empregada para verificar e classificar substâncias quanto à sua capacidade de provocar danos agudos aos organismos vivos, especialmente letalidade, e podem oferecer contribuição para estabelecer parâmetros de segurança juntamente com outros dados de toxicidade para a saúde humana (VALADARES, 2006; ZATTA et al., 2009). A toxicidade aguda também pode ser expressa pela quantidade necessária, em mg/kg de peso corpóreo, para provocar a morte de 50% dos animais estudados, sendo representada pela Dose letal média (DL50) (VALADARES, 2006).