Relatório de Bioquimica
RELATÓRIO PRÁTICO DE BIOQUÍMICA
Aracaju -SE
2014
DISCENTES :
I. TÍTULO: Espectrofotometria Parte I:Determinação do Espectro de absorção de corantes.
II. TEMA: Espectro de absorção de corantes.
1. Introdução:
A espectrofotometria é um método de análise óptica muito usado nas investigações biológicas e físico-químicas e pode ser conceituada como um procedimento analítico através do qual se determina as concentrações de espécimes químicas mediante a absorção da luz. O instrumento utilizado, espectrofotômetro, permite a comparação entre a energia absorvida e a energia transmitida através de uma substância onde conhecemos a quantidade de soluto presente e outra que não conhecemos a quantidade. A técnica espectroscópica é baseada no aumento de energia em função do aumento da frequência da radiação incidida. Assim, seus elétrons ficam excitados e ocorre uma transição de um orbital de mais baixa energia para outro de maior energia. A cor das substâncias se deve a absorção de alguns comprimentos de ondas da luz branca que incide sobre elas, deixando visível ao olho apenas aqueles comprimentos de ondas que não foram absorvidos. (Referência: De Oliveira, Marcos Vinícius Paiva – APLICAÇÕES DE ESTUDOS BIOQUÍMICOS QUANTITATIVOS EM CIÊNCIAS BIOLÓGICAS E DA SAÚDE - http://www.fara.edu.br/sipe/index.php/renefara/article/view/54)
2. Objetivo:
Construir o espectro de absorção do Azul de bromo fenol (ABF) e Metilorange (MO)
Determinação do ƛ (comprimento de onda) (nm) onde se observa o máximo de absorção dos corantes.
3. Metodologia:
Transferir 5 ml das soluções dos corantes para duas cubetas em separado.
Varrer o espectro de absorção comprimentos de onda (nm) designados abaixo lembrando que sempre deve-se zerar o equipamento em branco (T:100%, A:0,000)
PARA MO – 415,445,460,490,520,535
PARA ABF – 520, 535, 550, 580, 610, 640
4. Resultados e discussões :
A leitura da transmitância foi realizada em