Relatorio Bioquimica

MATERIAL
EXPERIMENTO A
6 tubos de ensaio
1 pipeta volumétrica
3 ml de solução padrão redutora (glicose 6 mM + frutose 6 mM)
9 ml de solução tampão
12 ml de reagente DNS
96 ml de água destilada banho-maria fervente
EXPERIMENTO B
7 tubos de ensaio
1 pipeta volumétrica
7 ml de sacarose 5% em tampão
3,5 ml de tampão ph 4,77
3,5 ml de enzima invertase
12 ml de reagente DNS
112 ml de água destilada banho-maria fervente banho-maria 37°C recipiente com gelo
EXPERIMENTO C
7 tubos de ensaio
1 pipeta volumétrica
3,65 ml de sacarose 5% em tampão
7,35 ml de tampão ph 4,77
3 ml de enzima invertase
12 ml de reagente DNS
112 ml de água destilada banho-maria fervente banho-maria 37°C recipiente com gelo

PROCEDIMENTO EXPERIMENTAL

EXPERIMENTO A - CONSTRUCÃO DA CURVA PADRÃO

Adicionar a seis tubos volumes crescentes de solução padrão :
Tubo 1: 0,2 ml
Tubo 2: 0,4 ml
Tubo 3: 0,6 ml
Tubo 4: 0,8 ml
Tubo 5: 1,0 ml
Tubo branco: 0 ml

Completar o volume em cada tubo para 2,0 mL com tampão :
Tubo 1: 1,8 ml
Tubo 2: 1,6 ml
Tubo 3: 1,4 ml
Tubo 4: 1,2 ml
Tubo 5: 1,0 ml
Tubo branco: 2,0 ml Adicionar em seguida 2 mL do reagente DNS em todos os tubos.
Tubo 1: 2,0 ml
Tubo 2: 2,0 ml
Tubo 3: 2,0 ml
Tubo 4: 2,0 ml
Tubo 5: 2,0 ml
Tubo branco: 2,0 ml

Colocar os tubos em banho-maria fervente por 10 minutos. Após este tempo, esfriar em água corrente e adicionar 16 mL de água destilada. Agitar com inversão da posição na vertical.

Ler as absorbâncias a 540 nm contra o branco.

EXPERIMENTO B) EFEITO DA CONCENTRAÇÃO DA ENZIMA

Manter os tubos no gelo.
Adicionar aos sete tubos 1,0 ml de sacarose :
Tubo 1: 1,0 ml
Tubo 2: 1,0 ml
Tubo 3: 1,0 ml
Tubo 4: 1,0 ml
Tudo 5: 1,0 ml
Tubo 6: 1,0 ml
Tubo branco: 1,0 ml

Adicionar volumes decrescentes de solução tampão :
Tubo 1: 0,9 ml
Tubo 2: 0,7 ml
Tubo 3: 0,5 ml
Tubo 4: 0,3 ml
Tudo 5: 0,1 ml
Tubo 6: 0 ml
Tubo branco: 1,0 ml

Adicionar volumes crescente de enzima:
Tubo 1: 0,1 ml