Progreção
Coloração de Gram
Relatório apresentado à disciplina de Microbiologia Clínica do Curso de Farmácia da Faceres ministrada pelo Prof. MSc. Daniel Fernandes de Oliveira como requisito parcial para a avaliação do desempenho na disciplina.
Ceres
2011
1. Introdução A Coloração de Gram é uma técnica de coloração diferencial que permite distinguir dois principais grupos de bactérias: gram positivas e gram negativas, por microscopia óptica.
2. Objetivo da técnica Diferenciar as bactérias gram positivas, que no procedimento da técnica se colorem de roxo e as gram negativas se colorem de vermelho.
3. Fundamento do método utilizado Nas gram positivas a camada de peptideoglicano é mais espessa e retém mais o corante primário ( cristal violeta ), apresentando a cor violeta. As gram negativas possuem uma estreita camada de peptideoglicano facilmente descorada pelo álcool ou mistura de álcool acetona. Ao final as bactérias descoradas na 2° etapa da coloração são coradas por fucsina ou safranina, ficando com coloração vermelha.
4. Amostra utilizada Foi utilizada amostra bucal, coletada com swab estéril.
5. Descrição da técnica
1- Com um swab estéril foi coletada a amostra bucal.
2- Foi feito um esfregaço homongêneo espalhando a amostra sobre uma lâmina.
3- Fixou o material pelo calor, passando sobre a chama da lamparina de 3 a 5 vezes.
4- Colocou a lâmina em um suporte e cobriu-a toda com cristal violeta, esperando por 1 minuto.
5- Lavou a lâmina em água corrente retirando somente o excesso do corante, tendo cuidado com o esfregaço.
6- Cobriu a lâmina com lugol, esperando por mais um minuto.
7- Lavou a lâmina com água corrente, mais