Kits Diagnóstico Imunologia Veterinária

UENF- Universidade Estadual do Norte Fluminense Darcy Ribeiro

Imunologia
KITS DE DIAGNOSTICO IMUNOLÓGICO

Nome: Letícia Leite
Data: 30 de janeiro de 2014

Diálise de equilíbrio
A afinidade de um anticorpo que se liga a pequenos antígenos, como os haptenos, que podem se difundir livremente através de uma membrana de diálise, pode ser determinada diretamente pelo método de diálise de equilíbrio. Coloca-se uma quantidade conhecida de anticorpos, cujas moléculas são muito grandes para cruzar a membrana de diálise, em um saco de diálise junto com diferentes quantidades de antígenos. As moléculas do antígeno que se ligam ao anticorpo não podem mais cruzar a membrana, de forma que apenas as moléculas de antígeno livre podem se equilibrar dos dois lados. Por meio da medida da concentração de antígeno dentro e fora do saco de diálise, pode ser determinada a quantidade de antígeno que está ligada, bem como a quantidade de antígeno livre após o equilíbrio ter sido atingido. Como se conhece a quantidade de anticorpos presente, a afinidade do anticorpo e o número de sítios de ligação específica para o antígeno por molécula de anticorpo podem ser determinados com essas informações. Os resultados em geral são avaliados por análise de Scatchard. Essas análise foram usadas para demonstrar que uma molécula de anticorpo IgG possui dois sítios idênticos de ligação de antígeno. Enquanto a afinidade mede a força de ligação de um determinante antigênico a um único sítio de ligação de antígeno, um anticorpo reagindo com um antígeno que tenha múltiplos epítopos idênticos ou com a superfície de uma gente patogênico irá frequentemente se ligar a esta molécula ou partícula com seus dois sítios de ligação de antígeno. Isso causa um aparente aumento da força de ligação, pois ambos os sítios devem ser liberados ao mesmo tempo para que as duas moléculas se dissociem, Este fenômeno é frequentemente chamado de cooperatividade na ligação. A força total de