Influencia Da Temperatura

Influencia da temperatura
A temperatura é um dos fatores que alteram a atividade enzimática. Com o aumento gradual da temperatura, a velocidade da reação tende a aumentar, visto que com isso as moléculas adquirem maior agitação, assim aumenta a possibilidade de colisão. Porém, esse efeito só se observa até o meio atingir certa temperatura, denominada temperatura ótima. A partir deste valor de temperatura, a velocidade começa a diminuir, pois a agitação das moléculas continua aumentando, até que chega a um ponto onde as vibrações se tornam muito intensas, o que resulta numa quebra das ligações que estabilizam a estrutura espacial da enzima, ou seja, ela desnatura.
A partir da leitura do espectrofotômetro, é possível calcular a atividade enzimática, da seguinte maneira:
Utilizando a equação do gráfico:
Y = 0,2598x – 0,0096
Onde y corresponde ao valor da leitura no espectrofotômetro, e x corresponde à concentração de açúcar redutor.
Utilizando o valor obtido na leitura do tubo 1:
1,611 = 0,2598x – 0,0096
1,611+0,0096 = 0,2598x
X = 1,6206/0,2598
X = 6,24 g/L de sacarose.
Há a necessidade de saber quanto tem de sacarose no volume final, que é 10 mL.
6,24 g/L = 6,24 mg/mL
6,24 mg/mL x 10mL = 62,4 mg de sacarose
Sabe-se que a sacarose possui massa molar no valor de 180 g/mol ou 180 mg/mmol, assim sendo possível calcular a quantidade de matéria no tubo: n = 62,4 mg / 180 mg n = 0,347 mmol de sacarose
Para o cálculo da atividade, necessita-se a transformação de unidade para umol (micro mol):
0,347 mmol x 1000 = 347 umol de sacarose
Por fim, o valor em umol é dividido pelo tempo do experimento em minutos:
U = 347 umol / 15 minutos = 23,13 umol/min
Os cálculos para os tubos 2 e 3 foram feitos da mesma forma.
Assim, verificam-se os valores obtidos:
Valor da absorbância
Tubo 1 (0°C)
1,611
Tubo 2 (37°C)
0,962
Tubo 3 (100°C)
1,440

Atividade enzimática calculada
Tubo 1 (0°C)
23,13 umol/min
Tubo 2 (37°C)
13,9 umol/min
Tubo 3 (100°C)
20,7 umol/min

Como observado, em diferentes