Coloração de gram

FACULDADE LEÃO SAMPAIO BIOMEDICINA 305.3- NOTURNO

CAROLINE THALITA, FRANCISCA ILMA E RAUL SOUSA

COLORAÇÃO DE GRAM
MICROBIOLOGIA

BARBALHA-CE
2012

1. INTRODUÇÃO As bactérias podem ser divididas em dois grandes grupos, as Gram positivas e as Gram negativas. Assim, podem ser diferenciadas pela: Presença de mais camadas de peptídeosglicanos, não apresenta membrana externa, presença de membrana externa flexível, sendo uma segunda bicamada fosfolipídica, ausência de periplasma, presença de periplasma, entre outras.
Um modo de diferenciar as bactérias Gram positivas das Gram negativas é pelo método denominado coloração de gram. Esse método requer a utilização de corantes específicos, tais como lugol, fucsina e cristal violeta. O lugol permite a formação de complexos CVI (Cristal Violeta Iodo) insolúveis em água, assim, o esfregaço com as bactérias apresentam, com o uso do cristal violeta, a coloração roxa. Depois outros passos são seguidos para a determinação, o que veremos adiante.

2. MATERIAIS E MÉTODOS * Lâminas; * Alça de Platina; * Tubo com Estafilococos aureus; * Tubo com Escherichia coli; * Bico de Bussen; * Corantes: Cristal violeta e Fucsina; * Fixador: Lugol; * Diferenciador: Álcool acetona; * Água destilada; * Máscaras e Luvas.

Os métodos utilizados foram os seguintes:

1. Em uma lâmina limpa, identificamos a mesma com as iniciais da equipe. 2. Flambamos a alça de platina no Bico de Bussen. 3. Dentro da zona de segurança do Bico de Bussen e com a alça bacteriológica devidamente flambada, coleta-se o inóculo do meio de cultura (Estafilococos aureus e Escherichia coli) e espalha o mesmo na lâmina com o auxílio da alça. 4. Com o esfregaço preparado, adiciona-se o cristal violeta, corante principal, de modo a cobrir todo o esfregaço durante um minuto. Lava-se o esfregaço com água destilada para a retirada do excesso de cristal