Coloração de Gram e Ziehl Neelsen
Em nossa primeira aula de laboratório de microbiologia, tivemos o objetivo de enxergar as colônias de bactérias. No entanto foi necessária a coloração de lâminas pelo método Gram e ZiehlNeelsen. O propósito era observar bem as técnicas de coloração e melhor visualização da matéria administrada em sala de aula sobre os grupos de bactérias existentes. Observar os resultados e discutir, com base no conteúdo, as colorações apresentada.
Material
Os materiais utilizados para a coloração foram:
Coloração de Gram
- Lâminas com o esfregaço de bactérias
- Bico de Bunsen
- Pinça
- Cristal Violeta
- Lugol (mordente)
- Álcool
- Fucsina
-Luvas de procedimento
Coloração de ZiehlNeelsen
-Lâminas com o esfregaço de escarro
-Bico de Bunsen
-Pinça
-Chumaço de algodão
-Luvas de procedimento
- Álcool
- Fucsina Funicada
- Álcool-acido
- Azul de metileno
Métodos
Coloração de Gram
1) Após a obtenção de um esfregaço, segurando a lâmina com uma pinça, devemos secar e fixar o esfregaço pelo calor moderado do bico de bunsen, passando a lâmina pela chama três vezes.
2) Em seguida cobrir o esfregaço com o primeiro corante: Cristal Violeta, deixando agir por um minuto. Deixar escorrer o corante, fazer uma pequena lavagem na água corrente.
3) Logo, devemos cobrir com a substância mordente (Lugol), para fixar, por um minuto. Escorrer e lavar em água corrente.
4) Fazer a descoloração com o álcool, até que este liquido não arraste mais corante. Porem, esta é uma etapa delicada. É importante não aplicar o álcool diretamente no esfregaço, aplicar na lateral da lamina e deixar escorrer. Não aplicar em excesso. Em seguida lave novamente a lâmina.
5) Aplicar o segundo corante sobre o esfregaço: Fucsina, por 30 segundos.
6) Escorrer o corante e lavar novamente com água corrente.
7) Secar a preparação com papel filtro e observar em microscópio
Coloração de ZielhNeelsen
1) Após preparar o esfregaço, segurando a