Métodos de diagnósticos em microbiologia

Aula Prática n.º 2
Exame directo de produtos biológicos. Diferentes processos e técnicas de microscopia.
Morfologia dos microrganismos ao microscópio óptico.
Exames a fresco e após coloração: coloração Gram, coloração Ziehl-Neelsen, outras
Colorações

MORFOLOGIA DAS BACTÉRIAS AO MICROSCÓPIO ÓPTICO

Conhecer características morfológicas (dimensão, forma e tipo de associação) de bactérias ao microscópio óptico.
Conhecer princípios e técnicas de execução de preparações a fresco para microscópio óptico.
Executar e observar preparações a fresco entre lâmina e lamela para visualizar a dimensão, a forma e a mobilidade de células bacterianas.

PREPARAÇÕES DE MICRORGANISMOS PARA MICROSCÓPIO ÓPTICO (coloração Gram)

Conhecer princípios e técnicas de execução de preparações coradas para microscópio óptico.
Executar e observar colorações simples e colorações negativas.
Compreender princípios e química das colorações diferenciais.
Compreender princípios e química da coloração de Gram.
Executar e observar a coloração de Gram para visualizar a dimensão, a forma e o tipo de associação, e para diferenciar os dois grupos de bactérias: Gram positivo e Gram negativo.

Texto de apoio:

Métodos de coloração para microrganismos.
Colorações: composição, características e execução

1 – preparações a fresco entre lâmina e lamela
2 – Preparações com coloração

Qualquer tipo de técnica para execução de preparações coradas envolve três etapas idênticas e fundamentais.

– Executar o esfregaço

Um esfregaço consiste numa preparação seca de células microbianas numa lâmina de vidro. Primeiro é importante que as lâminas estejam limpas. Depois os microrganismos devem ser espalhados na lâmina em determinada concentração de modo que fiquem adequadamente separados uns dos outros. É absolutamente essencial evitar esfregaços espessos, considera-se que um bom esfregaço é aquele que, quando seco, aparece como uma fina camada esbranquiçada.
Esfregaços feitos a