colora o de gram

Disciplina: Microbiologia básica
Professora: Larissa Morais
Aula Prática: Coloração de Gram

Introdução
A técnica de coloração de Gram foi descoberta pelo físico dinamarquês Christian GRAM, em 1884. A Coloração de Gram é muito utilizada na bacteriologia permitindo a distinção entre bactérias Gram positivas (púrpura) e Gram negativas (rosa). A diferença entre os dois tipos de células relaciona-se com a estrutura da parede celular das bactérias. Assim a parede celular das bactérias Gram positivas é formada por uma camada espessa de peptideoglicano, enquanto que a parede celular das Gram negativas é formada por uma camada fina de peptideoglicano, rodeada por uma camada externa de lipopolissacarídeo e proteínas. Diferenças na permeabilidade dessas membranas aos reagentes químicos, levam a diferenças de coloração. Embora a grande maioria das bactérias possa ser corada por tal método, algumas não o fazem satisfatoriamente, exigindo técnicas especiais de coloração.
Elas são as micobactérias, nocardias, espiroquetas, micoplasma, riquétsias e c1amídias.

Objetivos
• Corar uma lâmina pelo método de Gram;
• Reconhecer bactérias Gram positivas e Gram negativas ao microscópio;
• Compreender a importância dessa coloração para microbiologia clínica;
• Compreender cada etapa do processo de coloração, bem como a função de cada substância utilizada.

Material
• Placa de Petri contendo crescimento bacteriano
• Lâminas para preparação do esfregaço
• Solução salina
• Alça de platina
• Bico de bunsen
• Bateria de corantes para o Gram

Preparação do esfregaço
• Limpar uma lâmina de vidro (passar algodão embebido em álcool)
• Quando se tratar de uma cultura em meio líquido, com uma alça de inoculação, tomar uma pequena porção da cultura, observando as precauções de assepsia, e colocá-la sobre a lâmina espalhando-a para formar um esfregaço fino e uniforme.
• Quando a cultura for em meio sólido, colocar uma gota de água destilada sobre a lâmina e com uma alça de