Tecnologia do DNA Recombinante

Tecnologia do DNA recombinante ICS – Ciências Biológicas Disciplina: Biotecnologia e Bioinformática Tecnologia do DNA recombinante déc. 70 conhecimento de mecanismos biomoleculares enzimas biológicas clivagem, ligação e síntese do DNA transcrição reversa do RNA isolamento e purificação de ácidos nucleicos CLONAGEM MOLECULAR Tecnologia do DNA recombinante inserto + vetor molécula de DNA recombinante + célula hospedeira transformante CLONAGEM MOLECULAR: isolamento e propagação de moléculas idênticas de DNA Enzimas de restrição 1953 - mecanismos de defesa procariótica contra a infecção viral endonucleases de restrição sítio de restrição proteínas monoméricas ou diméricas reconhecimento e clivagem de uma sequência específica de DNA exógeno grupo metil metilação do DNA endógeno citosina 5-metilcitosina Enzimas de restrição 1973: utilização in vitro sítios de restrição (região de reconhecimento): 4 a 8 pares de bases (pb) – geralmente 4 a 6 pares de bases simetria rotacional : sequências palindrômicas clivagens cegas ou abruptas clivagens coesivas Enzimas de restrição hidrólise da ligação fosfodiéster 3’ OH e 5’ fosfato Enzimas de restrição (II) especificidade relevância do tamanho do sítio de restrição Enzimas de restrição (II) Sítio de restrição Nome da enzima Origem (organismo) Extremidade 5’ GGATCC 3’ 3’ CCTAGG 5’ BamHI Bacillus amyloliquefaciens H coesiva…

DO CURSO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS. DISCIPLINA DE BIOTECNOLOGIA. DNA RECOMBINANTE E RECOMBINAÇÃO :TRANSFORMAÇÃO, TRANSDUÇÃO E CONJUGAÇÃO. Macapá AP Janeiro / 2013 ii UNIVERSIDADE FEDERAL DO AMAPÁ. PRÓ-REITORIA DE ENSINO DE GRADUAÇÃO. COORDENAÇÃO DO CURSO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS. DISCIPLINA DE BIOTECNOLOGIA. DOCENTE : OENDERSON RODRIGUES DA COSTA. DNA RECOMBINANTE E RECOMBINAÇÃO :TRANSFORMAÇÃO, TRANSDUÇÃO E CONJUGAÇÃO. Pesquisa acadêmica como requisito obrigatório…

os direitos reservados A reprodução não autorizada desta publicação, no todo ou em parte, constitui violação dos direitos autorais (Lei nº 9.610) EMBRAPA ALGODÃO (Campina Grande, PB) Conceitos Básicos de Técnicas em Biologia Molecular, por Liziane Maria de Lima. Campina Grande, 2008 27p. (Embrapa Algodão. Documentos, 191) 1. Cronagem molecular. 2. Manipulação de DNA. 3. Extração de DNA. 4. Purificação de DNA. 5. Sequenciamento de DNA. I. Lima, L.M. de II. Título. III. Série.…

1. Objetivos: Obtenção de colônias recombinantes de E.coli DH5α a partir da transformação do vetor pTZ57R/T ligado a um fragmento de DNA de 953 pares de bases e realização de uma extração plasmidial a partir de uma colônia previamente preparada. 2. Introdução: 2.1. Processo de Clonagem do DNA in vivo: A tecnologia do DNA recombinante consiste em um conjunto de técnicas que permite identificar, isolar e multiplicar um gene interesse, tendo como objetivo determinar o…

de DNA idênticas, in vitro, a a partir de um único ancestral. Os clones seriam, então,as cópias deste modelo. Segundo FAHEL (2006) a técnica de clonagem é útil para construção de bibliotecas de gens e expressão de proteínas. Para tal é inserido em um vetor, como plasmídeos, um fragmento do DNA que se quer estudar. Alguns vetores têm seu DNA modificado para otimizar a inserção de moléculas de DNA e facilitar a seleção de colônias bacterianas que contém o plasmídeo com o fragmento…

Sumário Introdução 1 1 Histórico das Descobertas Genéticas 1 2 Conceitos Básicos 3 3 Tecnologia do DNA Recombinante 3 4 Enzimas de Restrição 4 5 DNA Ligase 6 6 Transformação Bacteriana 6 7 Vetores 7 7.1 Plasmídeo 7 7.2 Fagos 7 7.3 Cosmídeo 7 7.4 Vírus 8 7.5 Bacteriófago M13 9 Conclusão 9 Referências Bibliográficas 10 DESCOBERTAS GENÉTICAS Introdução O BIOQUÍMICO SUÍÇO, WERNER ARBER, DESCOBRIU AS ENZIMAS DE RESTRIÇÃO: “OBSERVEI QUE UM VÍRUS QUE SE REPRODUZIA…

CLONAGEM MOLECULAR E TRANSFORMAÇÃO BACTERIANA I - INTRODUÇÃO Atualmente é muito comum ouvirmos falar de clonagem em meios de comunicação que atingem o grande público. É também bastante comum assistirmos a discussões sobre ética e importância da clonagem entre pessoas que pouco sabem sobre a parte técnica do que estão discutindo e, muitas vezes, também sabem pouco sobre os objetivos dos pesquisadores com os experimentos que são mostrados de forma sensacionalista na mídia. Esta…

técnicas que englobam a manipulação do DNA visando à produção de bens de interesse comercial. Esta tecnologia do DNA recombinante, também conhecida como clonagem gênica ou clonagem molecular, compreende processos de transferência da informação genética (DNA) de um organismo a outro. Apesar de não haver uma metodologia universal, os experimentos seguem um protocolo similar:O primeiro passo consiste em caracterizar um gene de interesse. Tendo-se um conhecimento prévio do mesmo, o segundo…

A origem do termo clonagem vem da Genética Bacteriana que considera uma colônia de bactérias como um clone porque todos os indivíduos são geneticamente idênticos à bactéria inicial. A técnica central da metodologia do DNA recombinante é a clonagem molecular, a qual consiste no isolamento e propagação de moléculas de DNA idênticas. A clonagem molecular compreende pelo menos dois estágios importantes: primeiro o fragmento do DNA de interesse chamado de inserto é ligado a uma outra…

interação entre DNA (ácido desoxirribonucleico) e RNA (ácido ribonucleico) e a síntese proteica. Senso classificada como intermediária entre a bioquímica e a genética. Dentro da biologia molecular há as ENZIMAS DE RESTRIÇÃO existentes em bactérias com a capacidade de cortar as hélices da fita de DNA em pontos específicos levando a produção de fragmentos contendo pontas adesivas, exemplo: Em uma fita de DNA: A↓A G C T T T T C G A↑A cortando a fita do DNA transformando em 2, sendo uma: …