Análise Eletroforética De Proteínas

Orientador: Célia Maria de Almeida Soares Unidade Acadêmica/Departamento: Instituto de Ciências Biológicas II/Departamento de Bioquímica e Biologia Molecular Plano de trabalho Aluna: Priscyla Rocha da Silva Matrícula número 111921 Título: Análises proteômicas de isolados do fungo Paracoccidiodes brasiliensis durante privação de ferro Período: Agosto de 2012 a Julho de 2013. 1.Introdução Paracoccidioides brasiliensis é um fungo dimórfico que cresce como levedura ou…

(PAGE) em presença de uréia (uréiaPAGE) e dodecil sulfato de sódio (SDS-PAGE) para identificar a adulteração do leite de cabra pela adição do leite de vaca. Um método foi otimizado para preparação do caseinato de sódio em poucos minutos para análise eletroforética. Uréia-PAGE foi o método mais apropriado para identificação desse tipo de fraude, em decorrência da presença da caseína αs1 com migração mais rápida no leite bovino. A presença da αs1-caseína bovina foi detectada a partir…

migração diferenciada de espécies carregadas pela atração ou repulsão em um campo elétrico”, ou seja, é a migração de dos íons em um campo elétrico. Foi introduzida como uma técnica de separação por Tiselisus em 1937, quando colocou uma mistura de proteínas entre soluções-tampão conectadas por um tubo onde se aplicou uma diferença de potencial. Ao longo dos anos, a eletroforese foi sendo aperfeiçoada visando maior eficiência e diminuição dos efeitos térmicos provenientes da aplicação…

ELETROFORESE DEFINIÇÃO • É uma técnica laboratorial de separação de frações de proteínas, enzimas, DNA e RNA, baseada na migração das moléculas carregadas, numa solução, em função de aplicação de um campo elétrico. FUNDAMENTOS TEÓRICOS • Introduzida por Arne Tiselius em 1937, foi inicialmente realizada em meio líquido, sendo posteriormente aperfeiçoada com emprego de um meio-suporte. • É uma técnica versátil, relativamente simples, rápida e de grande poder…

de DNA. Basicamente consiste em aplicar um gel que servirá como matriz (algo semelhante à ummingau de maisena) para separar diferentes moléculas através do seu peso molecular por meio da aplicação de um campo elétrico. Cada mistura de DNA ou proteínas é colocada em poços diferentes do gel, e o gel é então colocado em placas de vidros que contém soluções tampões onde é submetido à diferença de potencial. Moléculas de pequeno peso molecular irão migrar para o pólo oposto mais…

Amplified Polymorphic DNA), por exemplo, são necessários somente alguns nanogramas de DNA, e para análise de RFLP (Restriction Fragment Length Polymorphism) são necessárias quantidades de DNA na ordem de microgramas. Normalmente os componentes da solução extratora variam de acordo com o protocolo utilizado, sendo que cada solução deve conter um tampão para estabilizar o pH, um sal para dissocia as proteínas, um detergente para solubilizar as membranas e um agente inativante das DNAses…

campo eletromagnético. As proteínas e os aminoácidos possuem cargas positivas, negativas ou neutras, dependendo do pH no qual se encontram. A mobilidade eletroforética é diretamente proporcional à carga da partícula e inversamente proporcional a viscosidade do meio. Se a migração é para o cátodo, temos cataforese, quando a carga total da partícula for positiva, e se é para o ânodo, temos anaforese, quando a carga da partícula for negativa. Quando um aminoácido ou proteína é dissolvido…

4Preparo da placa de corrida eletroforética PAGEREF _Toc391555342 \h 63.5Introdução das amostras PAGEREF _Toc391555343 \h 73.6Corrida eletroforética PAGEREF _Toc391555344 \h 73.7Leitura da placa de gel PAGEREF _Toc391555345 \h 84.Resultados e Discussão PAGEREF _Toc391555346 \h 85.Conclusão PAGEREF _Toc391555347 \h 96.Referencias Bibliográficas PAGEREF _Toc391555348 \h 107.Anexos PAGEREF _Toc391555349 \h 107.1Anexo 1 – Curva padrão PAGEREF _Toc391555350 \h 10 IntroduçãoAs proteínas são…

comumente empregados são os géis de poliacrilamida para proteínas e agarose para os ácidos nucléicos, em virtude de estes polímeros funcionarem como uma peneira molecular, ou seja, separar as espécies em função de sua massa e tamanho molecular, respectivamente, inibe a propagação do calor em virtude do atrito causado pela migração e pela aplicação do campo elétrico. 2. Como funciona a eletroforese Na eletroforese em gel cada molécula de proteína se liga a um grande número de…

como o crescimento populacional, citogenética, presença ou ausência de agentes contaminantes, suscetibilidade celular a diferentes amostras virais e identificação de espécies. Esta última pode ser feita por meio de testes imunológicos, cariótipo, análise de isoenzimas e, mais recentemente, através de técnicas moleculares. A maioria dos laboratórios mantém diversas linhagens celulares e, por isso, acidentes de contaminação cruzada podem ocorrer durante o cultivo e manuseio de células,…