Análise eletroforética de proteínas

BIOLÓGICAS BIOMEDICINA - BACHARELADO AULA PRÁTICA 4 Análise eletroforética de proteínas Fabiane Ramos Peixoto Juliana Barros Silva Lorena Alves Mesquita Goiânia, Maio de 2014 Introdução Proteína é considerada uma macromolécula composta por aminoácidos, unidos entre si por ligações pepitídicas, podendo ter características polares ou apolares, de acordo com o pH, devido à distribuição elétrica resultante das ligações covalentes ou iônicas de seus grupos estruturais. Os aminoácidos, por sua vez, possuem uma estrutura comum a todos os grupos contendo um grupo amino e um grupo carboxila e o denominado grupamento lateral, este último é a estrutura que fornece identidade ao aminoácido. A combinação de diferentes aminoácidos assim como a quantidade presente em uma molécula de proteína, confere a ela peso e carga elétrica distinta. A eletroforese é uma técnica de separação de proteínas utilizando-se de forças eletroforéticas e eletroendosmóticas presentes no sistema, as frações de proteínas são separadas e podem ser visualizadas a partir de corante sensível a elas. Só que eletroforese é um termo amplo que se refere à migração de todos os solutos ou partículas carregadas em um meio líquido sob a influência de um campo elétrico, sendo que as proteínas possuem cargas positivas e negativas, tendo sua mobilidade eletroforética diretamente proporcional à carga da partícula e inversamente…

quanto maior for a densidade de carga elétrica livre de uma partícula, maior será a sua velocidade quando submetida á ação de um campo elétrico; as mais lentas serão aquelas de menor densidade de carga elétrica livre. As proteínas contêm grupos ácidos (COO-) e grupos básicos (NH3+), portanto, quando em solução ou suspensão, podem apresentar-se: a) Carregadas positivamente, ou seja, apresentam maior número de grupos NH3+. Isto ocorre em pH ácido, uma vez que os grupos COO- vão se…

1. Objetivo: Análise por eletroforese de proteínas presentes do plasma sanguíneo. 2. Introdução: As proteínas são macro moléculas compostas por aminoácidos, com ligações covalentes entre si, podem ser polares ou apolares, de acordo com o pH, devido a distribuição elétrica resultante das ligações covalentes ou iônicas de seus grupos estruturais. A Eletroforese de Proteínas Plasmáticas, também conhecida como de Eletroforese de Proteínas Séricas (separa-se o plasma do sangue por meio…

diferença de potencial. Consiste em montar uma cuba eletroforética utilizando uma caixa plástica, chapas metálicas, garras tipo “ja­caré”, fios de cobre, carregador de pilha, interruptor e pilhas grandes. Sobre a caixa plástica foi preparada gela­tina (vermelha), afim de migrar as moléculas e posteriormente a sua distribuição por todo o meio. Em alguns casos o formato da molécula também influi, pois algumas terão maior facilidade para migrar pelo gel. E tem como princípio converter a…

Eletroforese A eletroforese é uma técnica analítica utilizada na análise de macromoléculas como proteínas e ácidos nucléicos. Essa técnica foi descoberta e empregada pela primeira vez em 1937 por Arne Tisélius um bioquímico russo. O efeito eletroforético tem como base a teoria de Debye-Hückel-Onsager, onde esta teoria de dissociação eletrolítica aceita o fato de as partículas carregadas moverem-se sob a influência de forças eletrostáticas para um eletrodo de carga oposta quando é…

Fundamental Western Blotting- Técnica de Identificação de Proteínas. Pirassununga – SP Maio/2014 Sumário 1. INTRODUÇÃO Todas as moléculas de proteínas são formadas por uma cadeia de aminoácidos, unidos entre si por ligações peptídicas. Os aminoácidos, por sua vez, possuem uma estrutura em comum, contendo um grupo amino e um grupo carboxila e o chamado grupamento lateral (Figura 1). Este último é a estrutura…

uma técnica analítica utilizada para analisar, separar e às vezes purificar macromoléculas: proteínas e ácidos nucléicos de diferentes tamanhos, carga ou conformação. Essa técnica foi descoberta e empregada pela primeira vez em 1937 por Arne Tisélius um bioquímico sueco. O efeito eletroforético tem como base a teoria de Debye-Hückel-Onsager, onde esta teoria de dissociação eletrolítica aceita o fato de as partículas carregadas moverem-se sob a influência de forças eletrostáticas para um…

* Cromatografia Método utilizado para separar certas classes de misturas complexas - de compostos orgânicos e inorgânicos – entre uma fase que se move e uma fase estacionária. * Cromatografia de troca iônica É a técnica mais utilizada para separar, identificar e quantificar os aminoácidos presentes em uma mistura, porém pode também ser usada em outros casos, como para separar proteínas com cargas elétricas diferentes e misturas de carboidratos. Como ocorre o processo Este…

....................................................... 3 3.4.1 Aplicação das amostras e corrida eletroforética .............................. 3 4. RESULTADOS E DISCUSSÃO ...................................................................... 4 5. CONCLUSÃO................................................................................................. 6 6. REFERÊNCIAS .............................................................................................. 6 ii 1. INTRODUÇÃO A…

pode ser feito através de métodos biofísicos que possibilitam separar e identificar esses componentes. A eletroforese é um dos métodos biofísicos de estudo das soluções mais utilizados em laboratórios e consiste na separação dos componentes de um sistema pela aplicação de um campo elétrico. Das muitas técnicas existentes para a análise de proteínas (enzimáticas ou não), a eletroforese em gel é sem dúvida a mais versátil e facilmente aplicável. Princípios teóricos da eletroforese:…