Biofísica

ELETROFORESE - CONCEITOS GERAIS

INTRODUÇÃO
A eletroforese é um processo analítico de separação de misturas, cujo principal agente é o campo elétrico. É também usada na identificação de substâncias, no estudo de homogeneidade de sistemas biológicos e na determinação de pontos isoelétricos. Atualmente seu campo de aplicação tem sido amplamente aumentado, devido á simplificação de aparelhagem utilizada e também á disponibilidade de meios de suporte altamente purificados, o que veio diminuir em muito o tempo gasto na separação.
LEIS E PRINCÍPIOS
Partículas, moléculas ou íons que têm a capacidade de adquirir carga eletrostática livre, em solução ou suspensão, migram para o pólo de carga oposta ás suas, quando submetidas á ação de um campo elétrico. Para que uma partícula se mova no campo elétrico, é necessário que possua carga, isto é, um excesso ou deficiência de elétrons, resultando em carga eletrostática livre. Esta migração é regida pela lei de Coulomb: partículas ou íons de carga positiva migram para o pólo negativo (cátodo); e moléculas, partículas ou íons de carga negativa vão para o pólo positivo (ânodo). As que vão para o cátodo são denominadas de cátions e aquelas que migram para o ânodo são chamadas de ânions.A velocidade com que uma partícula se movimenta no campo elétrico depende de vários fatores, mas o de maior importância é a sua propriedade em adquirir carga elétrica. Desta maneira, quanto maior for a densidade de carga elétrica livre de uma partícula, maior será a sua velocidade quando submetida á ação de um campo elétrico; as mais lentas serão aquelas de menor densidade de carga elétrica livre.
As proteínas contêm grupos ácidos (COO-) e grupos básicos (NH3+), portanto, quando em solução ou suspensão, podem apresentar-se:
a) Carregadas positivamente, ou seja, apresentam maior número de grupos NH3+. Isto ocorre em pH ácido, uma vez que os grupos COO- vão se neutralizando pela adição de prótons (H+) e, conseqüentemente, haverá excesso de grupos