Extra O DNA E Eletroforese

Extração de DNA e Técnica de Eletroforese Extração de ácidos nucléicos Requerimento essencial: • quantidade • pureza • integridade Etapas na obtenção de ácidos nucléicos: • Lise física ou bioquímica das paredes celulares e membranas • Purificação dos ácidos nucléicos: desnaturação / inativação de proteínas celulares • Precipitação Extração de ácidos nucléicos 1. Rompendo membranas celulares Lise das células  liberação dos componentes citoplasmáticos e/ou nucleares - bactérias (parede glicoproteica)  tratamento inicial com lisozimas (orifícios na parede  enfraquecimento  rompimento em solução hipotônica); outras soluções alternativas: temperatura elevada; sonificação Extração de ácidos nucléicos Células de plantas ou animais presentes em tecidos: • • Pré tratamentos adicionais para romper a matriz tecidual  célula individual  lise: digestão enzimática / homogeneização Célula vegetal – parede celular: tratamento mecânico para promover lise. Extração de ácidos nucléicos Células sem cobertura externa ou em solução: Sem tratamentos agressivos – tratamento com detergente SDS (SODIUM DODECYL SULFATE) – dodecil sulfato de sódio  substâncias tenso ativas que agem dissociando as proteínas dos ácidos nucleicos e dissolvendo proteínas de membranas solução de lise: NH4Cl / NH4HCO3 2. Desnaturando proteínas celulares: Lisados celulares contêm mistura complexa de macromoléculas: - DNA / RNA; proteínas, lipídeos, carboidratos. Fragmentos de membrana lipídica…

1) Descreva os tipos de ligações químicas e forças da dupla hélice do DNA. 2) O que significa Primer, e porque os primers são necessários para a replicação do DNA? 3) O que são helicases e topoisomerases? 4) Por que a síntese do DNA é contínua em um filamento e descontínua no filamento oposto? 5) Se a timina constitui 15% das bases em uma molécula específica de DNA, que porcentagem de bases tem a citosina? 6) Se o conteúdo de GC da molécula de DNA é de 48%, quais as…

– Extracção não enzimática de DNA de leucócitos a partir de sangue Objectivo  Extracção de DNA dos glóbulos brancos, a partir de sangue;  Extracção é feita a partir de glóbulos brancos uma vez que glóbulos vermelhos adultos já não têm núcleo. Reagentes utilizados Tampão TKM-1  Tris-HCl - Tampão que mantém pH estável  MgCl2 - Dissocia-se em co-iões - Catiões aos grupos fosfatos protegendo a integridade do DNA  EDTA - Impede a acção das nucleases - Agente quelante que…

1ª LISTA DE EXERCÍCIOS - GENÉTICA ESTRUTURA DO DNA, REPLICAÇÃO, TRANSCRIÇÃO, TRADUÇÃO E CÓDIGO GENÉTICO 1) Descreva os tipos de ligações químicas e forças da dupla hélice do DNA. 2) O que significa Primer, e porque os primers são necessários para a replicação do DNA? 3) O que são helicases e topoisomerases? 4) Por que a síntese do DNA é contínua em um filamento e descontínua no filamento oposto? 5) Se a timina constitui 15% das bases em uma molécula específica de DNA, que…

em relação constante, em um intervalo de tempo: morte exponencial. 2- Condições que influenciam a atividade antimicrobiana: - Tamanho da população. - Concentração do agente microbicida - Tempo de exposição - Temperatura, pH e viscosidade a que estão expostos. - Características dos micro-organismos 3- Mecanismo de destruição das células microbianas - Mecanismo de ação: alteração nas estruturas celulares e/ou em seu metabolismo. - Pode destruir: membrana,…

em relação constante, em um intervalo de tempo: morte exponencial. 2- Condições que influenciam a atividade antimicrobiana: - Tamanho da população. - Concentração do agente microbicida - Tempo de exposição - Temperatura, pH e viscosidade a que estão expostos. - Características dos micro-organismos 3- Mecanismo de destruição das células microbianas - Mecanismo de ação: alteração nas estruturas celulares e/ou em seu metabolismo. - Pode destruir: membrana,…

tratar uma superfície ou substância inerte. • Anti-sepsia: quando este tratamento é para um tecido vivo. Produto químico = anti-séptico Anti-Sépticos: menos tóxicos que os desinfetantes • Sanitarização: Redução de uma população a níveis considerados seguros (normas públicas) Ex. lavagem de copos, talheres e louças com alta temperatura ou aplicando desinfetante químico. Controle de Microrganismos -Sufixo CIDA: Nome dos tratamentos que causam a morte direta dos micróbios…

|(DNA, RNA ou ptns) | |Características fenotípicas (microorganismos) |↑ especificidade e ↑ sensibilidade | |Provas Bioquímicas (catalase, oxidade) | | |Efeitos citopáticos (diagnóstico viral) |…

UNIVERSITIES CURSO DE FARMÁCIA Processo biológico: Extrair o DNA das células da banana MANAUS-AM 2014 MANAUS - AM 2014 SUMÁRIO 1. INTRODUÇÃO....................................................................................................................04 2. OBJETIVO...........................................................................................................................07 3. MATERIAIS E…

Por que o gelo boia? Qual propriedade da água explica tal fenômeno? R: O gelo é mais leve que a água, por isso boia. Quando a água congela, suas partículas ficam mais separadas umas das outras e o ar invade esses espaços vazios. Assim o gelo se torna mais leve do que a água no estado líquido. 2) A tabela a seguir apresenta a composição média de algumas moléculas orgânicas presentes nos músculos e no cérebro humano. ● Qual molécula corresponde ao espaço hachurado? R: Ácidos. 3)…