tubos multiplos

Instituto Federal de Educação, Ciência e Tecnologia do Tocantins
Curso: Controle Ambiental
Disciplina: Análises Microbiológicas de Águas
Prof. Marcelo Mendes Pedroza
Assunto: Técnica de Tubos Múltiplos - Teoria

1.0 Fundamentação da Técnica Padrão de Tubos Múltiplos

O método consiste em inocular alíquotas da amostra ou diluições dela em uma série de tubos com meio de cultura apropriado e observar o crescimento bacteriano. Este se manifesta com mudança na cor do meio líquido e turbidez ou, só turbidez ou turbidez e gás. O gás produzido pelos microrganismos fica retido em tubos especiais (TUBOS DE DURHAM) que são colocados previamente dentro do tubo com o meio de cultura.

Pode-se inocular a amostra bruta ou diluição dela. O fator de diluição depende do número de bactérias que se suspeita que a amostra possui.

Suponha a seguinte situação: Preparam-se as seguintes diluições de uma amostra de água de um lago.

1:10 = 10-1; 1:100 = 10-2; 1:1000 = 10-3; 1:10000 = 10-4

Inocula-se 1 mL de cada diluição nos tubos com meio de cultura e incuba-se. O que pode acontecer?

1 – Geralmente tem resultado positivo as primeiras diluições até 10-n e negativos até 10-(n+1). Isto permite dizer que existe pelo menos uma célula bacteriana em cada tubo 10-n e nenhuma célula no tubo 10-(n+1). Por exemplo, se os resultados foram positivos até a diluição de 10-2 e negativos a partir de 10-3, pode-se dizer que a amostra contém mais de 100 e menos de 1000 bacterias/mL.

2 – Pode ocorrer que ao repetir o experimento anterior com a mesma amostra, os resultados sejam positivos até a diluição 10-3 e negativos a partir de 10-4. Isto quer dizer que a amostra contém mais de 1000 e menos de 10.000 bactérias/mL.

A partir de uma mesma amostra pode-se obter resultados diferentes, e essas diferenças resultam da distribuição não uniforme das bactérias na amostra de água.

A estimativa da densidade bacteriana pelo NMP (Número Mais Provável) está baseada em uma aplicação