so literatura
Gabriel Henrique R. n°: 5
ANÁLISE EM TUBOS MULTIPLOS
São Paulo
2013
ESCOLA ESTADUAL GETULIO VARGAS
Gabriel Henrique R. n°: 5
ANÁLISE EM TUBOS MULTIPLOS
Trabalho apresentado à disciplina de AMAAS do Ensino Técnico, da Escola Estadual Getúlio Vargas, como requisito parcial para avaliação.
Professor: Marcela.
São Paulo
2013.
INTRODUÇÃO
A seguir, iremos ver técnicas de manuseio de tubos múltiplos, e uma análise de coliformes usando essa técnica.
ANÁLISE DE COLIFORMES EM TUBOS MULTIPLOS
A técnica de tubos múltiplos é a mais tradicional para a análise de coliformes (totais outermotolerantes) e E.coli. Esta metodologia permite a quantificação por “número mais provável” (NMP) de microorganismos e é dividida em duas fases sucessivas, uma presuntiva e outra confirmativa. E esta ultima somente é realizada se houver crescimento positivo na etapa presuntiva.
O procedimento da fase presuntiva consiste em fazer a homogeneização e transferência de alíquotas e/ou diluições da amostra para tubos de ensaios contendo, no fundo, um tubo invertido para coleta de gás (tubo de Durhan), e o meio de cultura apropriado (caldo lauril triptose). Todos os tubos são incubados a 35°C durante 24 a 48 horas e posterior identificação dos que tiverem crescimento (positivo) de coliformes totais, resultado identificado pela ocorrência de reação ácida (coloração amarelada) ou produção de gás (retida no tudo de Durhan).
Na fase confirmativa, efetua-se o repique (transferência de alíquotas com alça de platina) dos tubos presuntivos positivos para tubos preparados da mesma forma que no anterior, porém contendo caldo verde brilhante. Todos os tubos são incubados a 35°C durante 24 a 48 horas e posterior identificação dos que tiverem crescimento (positivo) de coliformes totais,