Teste de Biureto
Disciplina: Prática de Laboratório
Prof.ª
PRÁTICA: REAÇÃO DO BIURETO – REAÇÃO GERAL PARA PROTEÍNA
Objetivo:
- Identificar a presença de proteína nas amostras, através da formação de um complexo de coloração violeta, resultante da reação entre o reativo de biureto e as ligações peptídicas.
Materiais e reagentes:
- Bastão de vidro
- Béckeres de 100 mL
- Papel de filtro
- Funil
- Provetas de 100 mL
- Erlenmeyer
- Espátula
- Estante para tubo de ensaio
- Pipetas graduadas
- Pisseta
- Pró-pipeta
- Reativo de biureto
- Solução de ovo-albumina
- Leite (50 mL)
- Vinagre (20 mL)
- Tubos de ensaio
Procedimento experimental:
- Mede-se 40 mL de leite numa proveta e transfere-se para um bécker de 100 mL, e em seguida adiciona-se 10 mL de vinagre. Espera-se cerca de 6 min;
- Filtra-se a solução anterior para obter a caseína como precipitado, que será o material retido no papel de filtro;
- Preserva-se um pouco do filtrado para ser utilizado posteriormente;
- Transfere-se um pouco do precipitado para um bécker de 100 mL com auxílio de uma espátula;
- Dissolve-se o precipitado em 15 mL água destilada para obter a solução de caseína, utilizando-se um bastão de vidro;
- Coloca-se em um tubo de ensaio 2 mL da solução de caseína (tubo 1) e adiciona-se 2 mL do reativo de biureto. Em seguida agita-se e observa-se;
- Coloca-se em um segundo tubo de ensaio 2 mL do filtrado obtido na preparação da caseína (tubo 2), e adiciona-se 2 mL do reativo de biureto. Agita-se e observa-se;
- Repete-se o mesmo procedimento empregando-se como amostras, 2 mL da solução de ovo-albumina (tubo 3) e 2 mL de água destilada (tubo 4). Agita-se e observa-se.
Fundamentos teóricos (Pesquisar):
- Definição de proteínas, estrutura e importância.
- A fórmula estrutural