Relatorio de Biologia Molecular

Aula prática de Biologia Molecular 2
Data: 04/09/2013

Extração de DNA de sangue periférico
1 Introdução Passou-se pouco mais de 50 anos, desde a descoberta de uma molécula, que hoje sabemos ser o ácido desoxirribonucléico (DNA) molécula longa, constituída por uma seqüência de nucleotídeos, que por sua vez é formado por três diferentes tipos de moléculas: um açúcar (pentose), um grupo fosfato e uma base nitrogenada. Essa importante molécula contém as informações básicas para a formação de um ser vivo e para sua reprodução. Uma molécula de DNA é formada por duas fitas de nucleotídeos, que ligados pelas pontes de hidrogênio, forma o que é chamado de dupla hélice. O modelo da dupla-hélice de Watson e Crick foi prontamente aceito pela comunidade científica. Nessa fita, as bases nitrogenadas seguem o seguinte padrão de combinação: A (adenina) sempre se liga com T (timina), e C(citosina) com G (guanina). A simples combinação dessas letras é o que forma os seres vivos.

2 Objetivos
Extração de DNA.

3 Resultados obtidos

4 Discussão succinta dos resultados

1. Por que é necessário dissolver o pellet após a centrifugação?
2. Qual a função do tampão TKM? Estabiliza o pH e separa o DNA do sobrenadante.
3. Em qual etapa do procedimento ocorrerá o rompimento das membranas das células? Ocorre o rompimento quando é adicionado 20L de NONIDET p-40 (Amersham) atuando como detergente que vai romper a bicamada lipídica das células.
4. Qual a função do NaCl 6M? Neutralizar a solução.
5. Por que as amostras são colocadas no banho-maria? Qual a função desta etapa? O aquecimento em banho-maria visa o desarranjo dos fosfolipídios das membranas e a desnaturação parcial das enzimas do tipo DNAse, evitando que o DNA seja cortado em pequenos fragmentos, o que dificultaria a sua extração.
6. Qual o papel do Etanol? O DNA não é solúvel em etanol (álcool etílico), por isso promove o agrupamento dos filamentos, tornando-se