proteinas

UNIVERSIDADE ESTADUAL DE MARINGÁ
DEPARTAMENTO DE ZOOTECNIA
PROFESSOR: Antonio Claudio Furlan

DOSAGEM DE NITROGÊNIO TOTAL (Método Kjeldahl)
O termo proteína bruta envolve uma série de compostos com estruturas semelhantes, porém com funções fisiológicas diferentes. Neste método determina-se o nitrogênio contido na matéria orgânica, incluindo o nitrogênio protéico propriamente dito e outros compostos nitrogenados não protéicos, tais como aminas, amidas, lecitinas e nitrilas.
Método Micro Kjeldahl - dividido em 3 etapas:
1 - Digestão - o nitrogênio orgânico é transformado em sulfato de amônio e os compostos orgânicos são convertidos em CO2, H2O, etc...
- Pesa-se 100mg de amostra seca ao ar e introduz no tubo de digestão.
- Adiciona de 4 a 5 ml de H2SO4 concentrado.
- Aquecer moderadamente, no início, evitando a formação de espuma e depois fortemente (400-450o C), até que o conteúdo do balão fique claro.
- Deixar esfriar e adicionar uma pequena quantidade de água destilada
(10 a 15 ml).
2 - Destilação - a fase que sucede a digestão, onde a amônia é separada e recolhida em uma solução receptora.
- Transferir o tubo para o conjunto de destilação e adicionar NaOH (1015 ml).
- Num erlenmeyer de 125 ml colocar 10 ml de H3BO3 + indicador e adaptar no conjunto destilador para receber o NH3. A ponta do condensador deve ser introduzida na solução, a fim de evitar perda de amônia.
- Destilar o conteúdo até em torno de 50 ml.
- Lavar a ponta do condensador com água destilada, assim como as paredes superiores do erlenmeyer.
O ácido bórico + indicador que, no início, era de cor de rosa, adquire cor verde.

3 - Titulação - determinação quantitativa da amônia contida na solução receptora. O NH4H2BO3 formado durante a destilação é titulado com uma solução padrão HCl 0,02N ou solução padrão de H2SO4 0,05N, com fator conhecido, até viragem do indicador.
Cálculo:
- Peso da amostra (mg)
- Fator do ácido (f)
- Titulação em branco (ml) - v1
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