Isolamento de protoplasto

Universidade Federal do Espírito Santo Centro de Ciências Agrárias Programa de Pós-graduação em Produção Vegetal

ISOLAMENTO DE PROTOPLASTOS
Alunas: Anelise Marques
Angélica Nogueira Micheli Spadeto Alegre – ES 2012

INTRODUÇÃO
• A diferença fundamental entre células de plantas e a dos animais é que as células de plantas são totipotentes e podem se dividir e desenvolver em plantas completas;
• Plantas apresentam também uma parede celular rígida constituída por: celulose, hemicelulose e pectina.

INTRODUÇÃO
• A parede celular -> é o maior impedimento na transferência direta de DNA para células individuais e na produção de híbridos somáticos pela fusão de células;
• Pode ser removida temporariamente de células de plantas sem perda significativa de viabilidade.

PROTOPLASTOS
• É um estado transitório das células; • São células vegetais desprovidas de parede celular;

• Estado onde as células estão desprotegidas mediante processos mecânicos ou enzimáticos;
• Formam células individuais em cultura; • Sua totipotência permite a regeneração de plantas inteiras.

PROTOPLASTOS
• Vantagens sobre as células normais: • Fácil de introduzir materiais (ex: DNA);

• Fácil de estudar processos que ocorrem neles;
• Fácil de fundi-las com outras células.

PROTOPLASTOS
• Podem ser produzidos por dois procedimentos:
• Mecânico corte de tecidos de plantas;

• Enzimático  digestão da parede celular através de várias enzimas hidrolíticas.

PROTOPLASTOS
 Mecânico:
• Cortes numerosos são feitas através do tecido da planta; • Permite que alguns protoplastos sejam liberados das células seccionadas; • Produção rápida de protoplastos em tecidos espessos como nos tubérculos de batata ou maçã, e produção baixa em feijoeiro.

PROTOPLASTOS
 Enzimático
• Protoplastos isolados por meio da digestão por enzimas extraídas de várias fontes (fungos e intestino de formigas): • Celulase; • Hemicelulase; • Pectinase;

• A digestão pela combinação destas três