PROTOPLASTOS

PROTOPLASTOS
CULTURA E APLICAÇÕES

Alunos: Gabriel Cruz e Lucas Lolis

INTRODUÇÃO
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Células vegetais desprovidas de parede celular; 

Estado transitório das células;

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Podem ser manipuladas conservando sua potencialidade de célula vegetal completa

HISTÓRICO
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1892 (Klercker): obtenção dos primeiros protoplastos por meio de isolamento mecânico;
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Baixa eficiência.

1960 (Cocking): enzimas pectocelulolíticas;
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Aumento do rendimento do processo.

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1970 (Nagata & Takebe): protoplastos de mesófilo de folha de
Nicotiana tabacum com capacidade de se dividir;

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1971 (Takebe et al): foram regeneradas as primeiras plantas a partir de protoplastos de N. tabacum.

APLICAÇÕES
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Utilizados no melhoramento de espécies de interesse agronômico:
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Plantas transgênicas;

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Híbridos somáticos;

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Variantes somaclonais;

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Estudo da expressão de genes isolados e sua regulação.

OBTENÇÃO
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Alguns parâmetros são importantes para se obter protoplastos viáveis: 

A espécie;

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O estado fisiológico;

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O tipo e a idade do explante;

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As condições de isolamento dos protoplastos.

Na teoria, protoplastos podem ser isolados a partir de qualquer tecido vegetal.

FONTE DE EXPLANTE
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Podem ser obtidos de uma série de órgãos (folha, fruto, caules e etc);

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Monocotiledônias: suspensões celulares embriogênicas;

DESINFESTAÇÃO DOS
EXPLANTES
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Os explantes são desinfestados em solução de hipoclorito de cálcio
(2%) ou de sódio (0,5 a 1%), durante 5 a 20min, com ou sem agitação. Posteriormente são lavados 3x com água destilada e autoclavada. 

Tanto a técnica, tempo de solução e concentrações dos compostos variam com o tipo e a idade do tecido.

ESTADO FISIOLÓGICO DA PLANTA
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Na cultura in vitro: a umidade, temperatura, fotoperíodo e intensidade luminosa devem ser controladas;
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A eficiência de plaqueamento aumenta 5x quando a intensidade luminosa é alterada para 3x mais do que sua condição normal;

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Quando essas plantas são cultivadas em temperatura