Determinação de hidróxido de magnésio em leite de magnésia.

PREPARO DE AMOSTRAS PARA MICROSCÓPIA ÓPTICA

Coloração – Corar microrganismos com corantes que enfatiza estruturas.
1° Passo (FIXADOS)
Os microrganismos são mortos
São preservados estruturas (ocorre distorção mínima)
Fixar os microrganismos na lâmina
ESFREGAÇO
1.
2.
3.
4.
5.
6.

Colocar um filme delgado de material ...
Espalhar na superfície
Deixar Secar no ar
A coloração é aplicada
Lavada com água
Seca com papel absorvente

ESFREGAÇO
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.

Colocar um filme delgado de material ...
Espalhar na superfície
Fixação
Deixar Secar no ar
A coloração é aplicada
Lavada com água
Seca com papel absorvente

Corantes
(sais compostos)

Íon Positivo
(Básicos)

Corante
+

•Violeta de genciana
•Azul de metileno
•Vermelho malaquita
•safranina

•Eosina

Íon Negativo
(Ácidos)

•Fucsina ácida
•Nigrosina

Bac pH 7,0
-

As bactérias são levemente carregadas negativamente em pH7,0

Corantes ácidos não são atraídos pela maioria das bactérias
Corante
ácidos
-

Bac pH 7,0
-

Assim a coloração cora apenas o fundo (Coloração negativa)
É valiosa na observação da forma geral da célula
(fundo escuro contrastante)

1. Coloração de cápsula
2. Tamanho
Micrografia óptica, empregando a técnica de coloração negativa, revelando células capsuladas

TÉCNICAS DE COLORAÇÃO
1. SIMPLES
2. DIFERENCIAL

3. ESPECIAL

1. SIMPLES

1. Aumentar a afinidade de uma coloração a uma amostra biológica

É uma única solução aquosa ou alcoólica de um único corante básico

Objetivo básico: Destacar todo o microrg., para que a forma celular e as estruturas básicas se tornem visíveis. 2. Revestir uma estrutura
Ex. Flagelo
Mordente

2. COLORAÇÕES DIFERENCIAIS
Reage de modo distinto com tipos diferentes de bactérias
1. Coloração de Gram

(classificação)

2. Coloração álcool-ácido resistente

Desenvolvida em 1884
Hans Christian Gram
(Bacteriologista – Dinarmaquês)

-

+

1. Um esfregaço