Curva de calibração de proteínas

INTRODUÇÃO

As proteínas são as moléculas orgânicas mais abundantes e importantes nas células. São encontradas em todas as partes de todas as células, uma vez que são fundamentais sob todos os aspectos da estrutura e função celulares. Existem muitas espécies diferentes de proteínas, cada uma especializada para uma função biológica diversa. Além disso, a maior parte da informação genética é expressa pelas proteínas. Pertencem à classe dos peptídeos, pois são formadas por aminoácidos ligados entre si por ligações peptídicas. Uma ligação peptídica é a união do grupo amino (-NH 2 ) de um aminoácido com o grupo carboxila (-COOH) de outro aminoácido, através da formação de uma amida. A importância das proteínas, entretanto, está relacionada com suas funções no organismo, e não com sua quantidade. Todas as enzimas conhecidas, por exemplo, são proteínas; muitas vezes, as enzimas existem em porções muito pequenas. Mesmo assim, estas substâncias catalisam todas as reações metabólicas e capacitam aos organismos a construção de outras moléculas - proteínas, ácidos nucléicos, carboidratos e lipídios - que são necessárias para a vida (GONÇALVEZ et al, 2004). O método de biureto baseia-se na reação do reativo do biureto, que é constituído de uma mistura de cobre e hidróxido de sódio com um complexante que estabiliza o cobre em solução. O cobre em meio alcalino reage com proteínas formando um complexo com uma ligação peptídica. O produto de reação apresenta duas bandas de absorção, uma em 270nm e outra em 540nm, esta última é mais utilizada para fins analíticos, porque diversas substâncias normalmente presentes na maioria dos meios analisados, absorvem na região de 270nm causando muita interferência no método (JUNIOR et al, 2007). A lei de Lambert-Beer descreve, quando um feixe de radiação monocromática incide sobre uma solução homogênea, uma parte desta radiação é absorvida. A intensidade