Fotocolorimetria e colorimetria

RELATÓRIO DE BIOQUÍMICA I

FOTOCOLORIMETRIA E ESPECTROFOTOMETRIA

Filipe Miranda Cabral
Thiago de Morais Mariano

Presidente Prudente
29/03/2010

SUMÁRIO

1 – OBJETIVOS 2
2 – INTRODUÇÃO 2
Absorbância 2
Transmitância 3
Técnicas 3 - Espectrofotômetria 3 - Fotocolorimetria ou colorimetria 4
3 - MATERIAIS E REAGENTES 5
4 - PROCEDIMENTO EXPERIMENTAL 5
4.1 Precipitação isoelétrica da caseína 5
4.2 Diluição do leite para dosagem de proteínas totais 5
4.3 Curva de calibração e dosagem de proteína 6
5 - RESULTADOS 6
5.1 Precipitação isoelétrica da caseína 6
5.2 Diluição do leite para dosagem de proteínas totais 7
5.3 Curva de calibração e dosagem de proteína 7
5.3.1 Calculo do valor de a: 7
5.3.2 Cálculo da concentração de proteínas no filtrado: 8 5.3.2.1 Calculo da diluição; 8 5.3.2.2 Cálculo da concentração de proteínas do filtrado por mL de leite; 9
5.3.3 Cálculo da concentração de proteínas totais: 9 5.3.3.1 Calculo da diluição; 9 5.3.3.2 Cálculo da concentração de proteínas totais por mL de leite; 10
5.3.4 Cálculo da concentração de caseína por mL de leite; 10
6 - CONCLUSÃO 10
BIBLIOGRAFIA 11
1 – OBJETIVOS

* Elaborar curvas de calibração e estabelecer a sensibilidade de um método fotocolorimétrico; * Relacionar os métodos fotocolorimétricos às situações onde poderão ser aplicadas, tendo como exemplo a dosagem de proteínas do leite pelo método da reação do biureto; * Resolver problemas específicos: cálculo das diluições e de concentrações.

2 – INTRODUÇÃO

Absorbância

Absorbância é a capacidade intrínseca dos materiais em absorver radiações em frequência específica. Usualmente, tal propriedade é empregada na análise de soluções em química analítica.
Em espectroscopia, a absorbância () é definida como

,

onde é a intensidade da luz com um comprimento de onda específico e que é passada por uma amostra (intensidade da luz transmitida) e é a intensidade da luz antes que entra na amostra (intensidade da