Identificação e doseamento de proteínas - relatório

Aula Prática nº 3
Aula Prática nº 3

Identificação e doseamento de Proteínas

Docente: Doutor Fouad Nejmeddine

Aluno: Maria de Fátima Loureiro Maia nº 48539

Índice

1. Introdução Pág.3 2. Desenvolvimento Pág.4
2.1 Procedimento para montagem de uma curva padrão Pág.4 2.2 Método de biureto para determinação de proteínas Pág.5 2.3 Procedimento Pág.6 2.4 Cálculos Pág.7

3. Anexos Pág.8 4.1 Gráfico curva padrão Pág.9 4.2 Tabelas 1, 2 e 3 Pág.10

4. Conclusão Pág.11

5. Bibliografia Pág.12

1. Introdução

Fotometria é uma técnica de análise quantitativa que envolve a medida de intensidade de absorção de luz monocromática de um composto químico em solução. Ou seja, analisa a absorvância (capacidade que tem uma solução de absorver uma certa quantidade de energia do feixe de luz incidente)
Devido à existência de uma proporcionalidade directa entre a concentração das soluções e a quantidade de luz absorvida em comprimentos de onda específicos, a espectrofotometria pode ser usada como um método quantitativo de identificação de substâncias. Contudo, faz se necessário, a obtenção de uma relação entre absorvâncias registradas em experimentos para diferentes concentrações de soluções, elaborando-se rectas de calibração, ou seja, curvas padrões.
Experimentalmente é possível conhecer os valores de absorvância de soluções conhecidas e assim, utilizando-se as curvas padrões, podem-se determinar matematicamente as concentrações destas.

2. Desenvolvimento

2.1 Procedimento para montagem de uma curva padrão (Lehninger, 1984).
Quando escolhido um método de dosagem, prepara-se uma solução padrão de concentração rigorosamente conhecida. Mede-se então com pipetas de precisão, diferentes volumes desta solução, completando-se com solvente a um volume final determinado. É calculado e anotado a concentração de cada