Fotocolorimetria e Espectrocolorimetria: Curvas de Calibração e Quantificação de Proteínas.

Sumário

1.OBJETIVOS 2
2.INTRODUÇÃO 2
2.1 – Métodos Fotocolorimétricos 2
2.2 – Leis da fotometria 3
2.3 – Método do biureto para determinação de proteínas 5
2.4 – Proteínas presentes no leite 5
3.PROCEDIMENTO EXPERIMENTAL 6
3.1 – Materiais e reagentes 6
3.2 – Parte experimental 7
3.2.1 – Precipitação isoelétrica da caseína 7
3.2.2 – Diluição do leite para dosagem de proteínas totais 7
3.2.3 – Curva de Calibração e dosagem de proteína 7
4.RESULTADOS E DISCUSSÕES 8
4.1 – Precipitação da caseína 8
4.2 – Proteínas do filtrado e Proteínas totais e Soluções padrão 8
4.3 – Medidas no espectrofotômetro. 9
4.5 – Determinação da porcentagem de caseína 13
5.CONCLUSÃO 14
6.REFERENCIAS 14

1. OBJETIVOS
A seguinte aula prática tem como objetivo elaborar as curvas de calibração e sensibilidade de um método fotocolorimétrico a partir da resolução de cálculos de diluições e concentrações. Relacionar o método fotocolorimétrico com situações nas quais ele pode ser aplicado, tendo como exemplo a dosagem de proteínas do leite pelo método da reação do biureto.

2. INTRODUÇÃO
2.1 – Métodos Fotocolorimétricos
O método fotocolorimétrico foi desenvolvido com a finalidade de dosar substâncias biológicas. Neste método são utilizadas reações que resultam em soluções coloridas. A intensidade da cor produzida é proporcional à concentração da substância que está sendo dosada. Em conseqüência desta proporcionalidade, é possível dosar substâncias em soluções de concentração desconhecida (amostra), ao comparar a intensidade da cor produzida por esta substância à intensidade da cor produzida pela mesma substância em outra solução onde a concentração é previamente determinada (padrão).
A diferença de coloração é muitas vezes imperceptível a olho nu. A medida da intensidade de cor é efetuada por instrumentos denominados fotocolorímetros ou espectrofotômetros. Estes instrumentos possuem uma fonte de luz branca, filtros coloridos (fotocolorímetro), prismas