Cromatografia em coluna

Cromatografia é uma técnica utilizada para analisar, identificar ou separar os componentes de uma mistura. A cromatografia é definida como a separação de dois ou mais compostos diferentes por distribuição entre fases, uma das quais é estacionária e a outra móvel.
Ela foi inventada por Mikhail Semenovich Tswett. Filho um imigrante russo e uma italiana, ele nasceu no ano de 1872 em Asti na Itália. Sua mãe morreu logo após seu parto, então ele foi criado em Genebra na Suiça. Tornou-se Ph.D. em Botânica no ano de 1896, mas devido seu pai ser chamado pelo serviço do seu país, ele teve de voltar à Rússia e lá o seu grau de Ph.D. não foi reconhecido, tendo de realizar os procedimentos novamente para tal conquista. Em 1910 publicou o livro intitulado "Clorofilas no mundo vegetal e animal" (Chlorophylls in the plant and animal world) para a obtenção do grau de doutor em ciências. No livro, Tswett descreve sua invenção para a separação de substâncias coloridas presentes em vegetais, a cromatografia.
Este experimento foi descoberto quando Tswett separou clorofila de uma mistura de pigmentos de plantas, através de uma coluna cheia de carbonato de cálcio em pó, fazendo a lavagem com éter de petróleo. Conforme a amostra descia pela coluna, apareciam bandas separadas e cores distintas. Palavra de origem grega, onde “cromo” significa cor e “grafia” significa escrita, ou seja, “escrita em cores”. Mas a cromatografia pode separar os componentes sem nenhum aparecimento de cor.
A cromatografia é preliminarmente uma ferramenta analítica para a separação de misturas, combinada com análises qualitativas e quantitativas das substâncias separadas. É uma poderosa e muito usada técnica de separação dos componentes de uma amostra.
Os componentes das amostras são distribuídos entre duas fases, uma das quais permanece estacionária, enquanto a outra flui entre os interstícios ou sobre a superfície da fase estacionária. O movimento da fase móvel resulta numa migração diferencial dos